Importanța și diagnosticul anticorpilor antifosfolipidici la femeile cu tulburări de reproducere
Abstract:
Anticorpii antifosfolipidici se leagă de fosfolipide sau de un complex fosfolipid-proteic. Prezența acestor anticorpi poate duce la formarea de tromboze și tulburări de sarcină, care este un simptom al unei boli autoimune neinflamatorii - sindromul antifosfolipidic. Principalele criterii de laborator pentru sindromul antifosfolipidic includ anticorpi cardiolipinici și anticorpi împotriva ß-2-glicoproteinei I. Alte tipuri de anticorpi detectați în serurile pacienților sunt anticorpii împotriva fosfatidilserinei, fosfatidiletanolaminei, protrombinei sau anexinei V. Originea și dezvoltarea exactă a acestor anticorpi nu sunt cunoscute, prin urmare, există discuții cu privire la care anticorpi sunt cei mai frecvenți la pacienții cu sindrom antifosfolipidic și care ar trebui incluși în principalele criterii. Prin urmare, scopul nostru a fost de a monitoriza apariția și efectul anticorpilor antifosfolipidici la femeile cu tulburări de reproducere și de a monitoriza tratamentul anticorpilor antifosfolipidici.
Cuvinte cheie: anticorpi antifosfolipidici, sindrom antifosfolipidic, infertilitate
* Toate tabelele, graficele și cifrele care fac parte din articol pot fi găsite în fișierul PDF atașat la sfârșitul studiului.
Introducere
Fosfolipidele încărcate negativ sunt o componentă esențială a tuturor membranelor și, prin urmare, sunt un antigen adecvat pentru anticorpii antifosfolipidici (APLA) (1). Acești anticorpi se leagă și de proteinele care formează complexe cu fosfolipide, pe care le includem
Eterogenitatea ridicată a APLA și influența lor asupra evoluției sarcinii sunt motivul pentru avorturi sau nașteri premature. Cu toate acestea, mulți medici nu iau în considerare efectul patologic al sistemului imunitar asupra reproducerii. Prin urmare, scopul nostru a fost să subliniem importanța APLA, în special a celor care sunt incluse în „necriterii”. În acest proiect, ne-am concentrat în principal pe monitorizarea incidenței APLA la femeile diagnosticate cu infertilitate și tratamentul acestor anticorpi.
Material și metodologie
Grupul a fost format din 1.246 de pacienți (vârsta: 20 - 50 de ani) cu diagnostic de infertilitate fără tratament. Serul a fost obținut din sângele colectat într-un sistem închis de colectare a gelului în timpul primei examinări. Am monitorizat opt tipuri de anticorpi antifosfolipidici în serurile pacienților, monitorizând anti-ß2GPI și ACLA din principalele criterii și anticorpi din „necriterii”: anticorpi împotriva fosfatidilserinei, fosfatidiletanolaminei, acidului fosfatidic, anexinei V și anticorpilor IgG și IgM împotriva protrombinei. Pentru a determina APLA, am folosit o metodă ELISA cantitativă bazată pe interacțiunea antigen-anticorp (anti-β2GPI - ORGENTEC, ORG 521S; ACLA - ORGENTEC, ORG 515S; acid antifosfatidic - Delta Biologicals Srl, Subsidiary of ERBA Diagnostics, CA-206; antianexină V - IMTEC, ITC59550; antifosfatidilserină - IMTEC, ITC59027; antifosfatidiletanolamină - IMTEC, ITC59400; antiprotrombină IgG/IgM - AIDA, REF 10229). Serurile au fost depozitate într-un congelator sub -18 ° C. Antigenul (de exemplu, β2GPI) este legat de faza solidă și incubat cu probe, calibratoare și controale care conțin anticorpi primari care interacționează cu antigenul pe faza solidă. Anticorpii primari sunt tratați ulterior
leagă secundarul de care se leagă conjugatul (peroxidaza de hrean). Rezultatul este determinat spectrofotometric (10).
Am evaluat statistic rezultatele obținute folosind programul statistic StatsDirect Statistical Analysis Software. În cazul datelor calitative, am numărat doar percentilele. Pentru testele bazate pe tratament, am stabilit mai întâi normalitatea datelor cu StatsDirect și apoi am selectat testul statistic Mann-Whitney (monitorizarea eficacității tratamentului pentru anticorpi împotriva fosfatidilserinei, fosfatidiletanolaminei, anexinei V și protrombinei IgG) pentru distribuirea anormală a datelor. La monitorizarea tratamentului pentru anticorpii anti-IgM și ß2GPI, am găsit o distribuție normală a datelor, așa că am folosit testul t asociat. Am considerat că rezultatele sunt semnificative statistic atunci când valoarea p a fost mai mică de 0,05.
Rezultatele
Dintre cei 1.246 de pacienți, 24% au fost femei pozitive pentru orice anticorp APLA (Tabelul 1). Dintre criteriile principale, anticorpii anti-ß2GPI au fost cei mai frecvenți (1,13%). ACLA a apărut la doar 0,40% dintre pacienți, ceea ce îl face cea mai mică proporție din orice APLA pe care am urmat-o. Dintre „necriterii”, anticorpii împotriva fosfatidilserinei au fost cei mai frecvenți (12,43%). Acești anticorpi au avut cea mai mare proporție dintre toate APLA monitorizate. Anticorpii IgM împotriva protrombinei au fost pozitivi la 8,51% dintre pacienți, iar anticorpii IgG antiprotrobină au fost pozitivi la 5,58% dintre pacienți. Anticorpii împotriva proteinei placentare anexină V au fost pozitivi la 1,59% dintre femei, în timp ce anticorpii fosfatidiletanolaminici au fost pozitivi la 0,92% dintre pacienți. Dintre „necriterii”, anticorpii împotriva acidului fosfatidic au fost cei mai puțin reprezentați, ceea ce a fost pozitiv la doar 0,70% dintre femei, ceea ce este cu 0,30% mai mare decât în cazul ACLA. Proporția de anticorpi individuali poate fi văzută în tabelul 1.
ACLA ca anticorpi cel mai puțin reprezentați a avut cea mai mare combinație cu un alt tip de APLA (100%). Au fost cele mai frecvente în combinație cu anticorpi împotriva β2GPI și fosfatidilserină (ambii 80%). Anticorpii fosfatidiletanolaminici au fost în combinație cu alte APLA în 81,82%, cu cea mai mare apariție cu anticorpii fosfatidilserinici (88,89%). Anticorpii împotriva acidului fosfatidic au fost combinați cu alte APLA la 2 din 3 pacienți pozitivi. Au avut o combinație de până la 100% cu anticorpi ACLA, anti-β2GPI și fosfatidilserină. Anticorpii anti-β2GPI au fost pozitivi cu anticorpi multipli la 42,86% dintre pacienți. Au avut cea mai frecventă combinație cu anticorpi ACLA și fosfatidilserină (ambii 66,67%). Anticorpii protrombinei IgG au fost mai frecvenți (32,31%) în combinație cu alte APLA decât anticorpii protrombinei IgM (30,30%). Anticorpii IgG împotriva protrombinei au fost preponderent în combinație cu anticorpi împotriva fosfatidilserinei și anticorpi IgM împotriva protrombinei (ambii 47,62%). IgM au fost cel mai adesea în combinație cu anticorpi anti-fosfatidilserină (43,33%). Anticorpii fosfatidilserinici au avut cel mai mic procent în combinație cu alți anticorpi (28,19%), în timp ce au fost cei mai pozitivi cu anticorpii IgM împotriva protrombinei (30,95%). Rezultatele pot fi văzute în tabelul 2.
În plus față de apariția APLA individuale, am monitorizat apariția acestora în funcție de vârstă. Am împărțit pacienții în 4 grupe de vârstă: 20 - 29 ani, 30 - 35 ani, 36 - 40 ani și 41 - 50 ani. Am observat dependența anticorpilor de vârstă numai în cazul anticorpilor împotriva β2GPI și protrombinei IgG (graficul 1). În plus, anticorpii anti-anexină V au fost mai mari la femeile în vârstă, dar diferența nu este semnificativă statistic. Apariția altora
anticorpii nu depindeau de vârstă. Pe baza informațiilor disponibile despre pacienți, am selectat un grup de pacienți la care a fost posibil să se monitorizeze efectul tratamentului asupra incidenței APLA. Aceste femei au fost tratate cu LMWH (heparină moleculară scăzută), aspirină, vitamina D și corticoizi. Am monitorizat conținutul anticorpilor înainte de începerea tratamentului și conținutul anticorpilor după începerea tratamentului. În plus față de anticorpii IgG la protrombină, toți pacienții au prezentat o scădere a APLA după inițierea tratamentului (Tabelul 3). Unii pacienți au fost pozitivi pentru mai multe APLA simultan și, în toate cazurile, a existat o scădere a anticorpilor după inițierea tratamentului, care au fost crescute înainte de tratament. Cu toate acestea, în unele cazuri, a existat o creștere a altor tipuri de anticorpi după tratament, care nu au fost pozitive înainte de tratament. Anticorpii împotriva anexinei V și ambele isotipuri ale anticorpilor protrombinici au fost cel mai frecvent crescute. Unii pacienți au rămas însărcinați după începerea tratamentului, dar nu sunt disponibile informații exacte cu privire la scăderea infertilității și succesul sarcinii din cauza sfârșitului studiului înainte de a obține aceste informații.
Discuţie
În studiul nostru, am analizat incidența APLA la femeile cu tulburări de reproducere. Acești anticorpi sunt responsabili pentru avorturi spontane, moarte fetală intrauterină, preeclampsie sau tromboză venoasă (2). Din cele 1.246 de femei, 24% au fost pozitive pentru unele
de la APLA. Anticorpii anti-ACLA și anti-ß2GPI sunt printre principalele criterii pentru APS, dar incidența lor la pacienții cu tulburări de reproducere este minoră. Opiniile cu privire la efectul prezenței anticorpilor ACLA și anti-ß2GPI asupra evoluției sarcinii sunt controversate. Pe de o parte, se afirmă că ACLA este implicată în probleme de reproducere, în timp ce pe de altă parte, ACLA nu este legată de morbiditatea sarcinii (11). În grupul nostru de femei, frecvența anticorpilor ACLA la femeile cu tulburări de reproducere nu a fost semnificativă (doar 0,4%), au apărut întotdeauna în combinație cu un alt tip de APLA. Anticorpii anti-ß2GPI au fost prezenți la doar 1,13% dintre femeile din cohorta noastră. Anti-β2GPIs au apărut în principal în combinație cu anticorpi fosfatidilserină și ACLA. Legătura dintre ACLA și anti-ß2GPI se poate datora faptului că ACLA are un epitop pe proteina ß2GPI, deci sunt capabili să se lege direct de aceasta. Prezența a două tipuri majore de anticorpi la femeile infertile crește probabilitatea de a dezvolta APS, precum și probleme de sănătate mai severe în timpul sarcinii (12).
În grupul nostru de femei infertile, anticorpii împotriva fosfatidilserinei au fost cei mai frecvenți (12,43%). Studiul realizat de Nayfe și colab. (2013) și Žigona și colab. (2013) afirmă că anticorpii fosfatidilserină sunt cei mai implicați în tulburările de sarcină. Anticorpii împotriva protrombinei au fost, de asemenea, crescuți. Izotipul IgM a fost mai frecvent decât IgG, dar în majoritatea studiilor izotipul IgG este cel mai asociat cu APS. Se crede că apariția IgM poate fi asociată cu o afecțiune infecțioasă în curs (15). IgG
izotipurile sunt asociate în principal cu pierderea fătului în stadiile incipiente ale sarcinii (16). Anticorpii anti-protrombină au, de asemenea, reacții încrucișate frecvente cu anticorpii fosfatidilserină și o astfel de combinație a fost implicată în creșterea trombozei și a tulburărilor de sarcină (9). În cazul nostru, o astfel de apariție combinată s-a găsit între anticorpii fosfatidilserină și anticorpii protrombină IgG (la 47,62% dintre femei) și s-a găsit în continuare între anticorpii fosfatidilserină și anticorpii protrombină IgM (la 43,33% dintre femei). Mai multe studii indică faptul că anticorpii protrombinici sunt dependenți de fosfatidilserină, de aceea se recomandă ca atât anticorpii fosfatidilserinici, cât și anticorpii protrombinici să fie examinați simultan într-o singură etapă ELISA. O astfel de examinare va îmbunătăți calitatea testului de diagnostic prin captarea mai multor anticorpi, deci pentru acesta
Pacienții noștri APLA-pozitivi au fost tratați cu aspirină, LMWH, vitamina D și corticoizi. Mai multe studii au arătat că tratamentul cu aspirină cu heparină sau corticosteroizi este mai eficient decât tratamentul cu aspirină singură (20,21). După desfășurare
A scăzut anticorpii împotriva fosfatidilserinei, etanolaminei și anexinei V. Au scăzut și anticorpii împotriva β2GPI și protrombinei IgM, dar această scădere nu a fost semnificativă statistic. În cazul anti-ß2GPI, acest lucru s-ar putea datora unui număr insuficient de pacienți pozitivi pentru acest anticorp. Anticorpii IgG anti-protrombină au crescut comparativ cu nivelurile de pre-tratament. Cu toate acestea, această diferență nu este semnificativă.
Concluzie
Anticorpii antifosfolipidici sunt implicați în tulburările de reproducere la aproape un sfert dintre femeile cu tulburări de reproducere. În studiul nostru, am arătat apariția frecventă a anticorpilor împotriva fosfatidilserinei (12,43%) și protrombinei (8,51% - IgM, 5,58% - IgG) la femeile cu tulburări de reproducere. În schimb, incidența anticorpilor clasici împotriva ACLA și anti-ß2GPI a fost foarte scăzută (0,40% și, respectiv, 1,13%). Anticorpii APLA au scăzut după inițierea tratamentului la pacienții cu APLA crescută (aspirină, vitamina D, LMWH și corticoizi). Tratamentul trebuie menținut și în timpul sarcinii pentru a preveni avortul spontan.
Literatură