obiecte

abstract

Principalul

Niveluri ridicate de Axl solubil (sAxl) în combinație cu ligandul receptorului Axl, Gas6, au fost detectate în ciroza hepatică și concepute ca un instrument de diagnostic. 20, 21, 22 Am raportat recent că sAx1 este un biomarker precis pentru fibroza avansată, ciroză și carcinom hepatocelular (HCC), care are o ASC de 0,918 pentru detectarea fibrozei avansate dovedite de biopsie (F> 3) și ASC de 0,935 pentru detectarea F4 comparativ cu controalele sănătoase. În acest studiu, am reevaluat sAxl ca biomarker al fibrozei hepatice în comparație cu testele ELF ™ și TE utilizând biopsia hepatică ca metodă de referință în testul și cohorta de validare.

Rezultatul

Populația de studiu

Au fost incluși un total de 392 de pacienți (vârsta mediană: 50, 8 ani; bărbați: 55%). Dintre aceștia, 361 de pacienți aveau boli hepatice cronice, adică NAFLD, hepatită virală (fie hepatită cronică B sau C), hepatită autoimună (AIH), boală hepatică colestatică (CLD, colangită sclerozantă primară [PSC] și colangită biliară primară [PBC]. sau sindrom de suprapunere, ALD, leziuni hepatice induse de medicamente (DILI) și ciroză criptogenă (Tabelul 1). Cohorta de testare, care a constat din 276 de pacienți cu boli hepatice cronice și 31 de controale sănătoase (Universitatea Medicală din Viena), a fost comparată cu un grup de validare (Universitatea Medicală din Graz) de 85 de pacienți. Cele două grupuri nu au diferit semnificativ în ceea ce privește vârsta, sexul și distribuția IMC. Niciunul dintre pacienți nu a avut insuficiență cardiacă severă. Boala renală cronică (ERC) a fost prezentă la 4,1% dintre pacienți (15/361). Niciunul dintre pacienți nu a prezentat CKD avansat (4 sau 5). Caracteristicile detaliate ale pacientului sunt prezentate în Tabelul 1.

Tabel în dimensiune completă

Rezultatele histopatologice au fost disponibile la 311 din 392 de participanți la studiu. F2, F3 și F4 au fost prezenți la 20,9% (n = 65), 10,3% (n = 32) și 20,3% (n = 63) pacienți (Tabelul 2a). Conform tehnicilor imagistice, ciroza a fost prezentă la 16,6% (n = 65) pacienți (Tabelul 1) (biopsie hepatică confirmată la 63/65, fără biopsie hepatică la 2/65, fără ciroză la 327 pacienți). Distribuția gradelor de fibroză între diferitele etiologii ale bolii hepatice, determinată de biopsia hepatică, este prezentată în Tabelul 2b. Toate rezultatele testelor funcției hepatice sunt prezentate în Tabelul 2c.

Tabel în dimensiune completă

Tabel în dimensiune completă

Tabel în dimensiune completă

Nivelurile de SAxl depind de stadiul fibrozei hepatice

Nivelurile de SAxl în conformitate cu etiologia bolilor hepatice sunt prezentate în Tabelul 3. Nivelurile de sAxl la pacienții cu AIH/CLD au fost semnificativ mai mari în grupul de validare. Acest lucru a fost explicat de nivelurile semnificativ mai ridicate de sAxl găsite la pacienții cu PBC, care s-a datorat selecției de selecție datorită dimensiunii reduse a eșantionului, deoarece doar 4 pacienți din cohorta de validare au fost comparați cu 13 pacienți din grupul testat. Nivelurile totale de sAxl au crescut în funcție de stadiul fibrozei (Figura 1). Nivelurile de SAxl au fost semnificativ mai mari la pacienții cu F4 comparativ cu F0 până la F3 (median sAxl: 71, 6, interval interquartil (IQR) [53, 91; 94, 73] față de 43, 4, IQR [35, 52; 55, 71 ]), precum și la pacienții cu ciroză, așa cum se arată în comparație cu pacienții fără ciroză, precum și cu controale sănătoase (median sAxl: 72, 06, IQR [54, 06; 9, 01] vs. 43, 3, IQR [35, 85; 55, 54] versus 40, 2 IQR [34, 2; 48, 0] (Figura 1) Împreună, aceste date arată că nivelurile de sAxl nu s-au modificat semnificativ în stadiile incipiente ale fibrozei hepatice (F0-F3), în timp ce sAxl este foarte crescut în ciroză hepatică (F4) comparativ cu fibroza avansată (F3).

Tabel în dimensiune completă

detectează

nivelurile serice de sAxl în funcție de stadiul fibrozei, precum și prezența cirozei hepatice pe baza metodelor imagistice. Diferențele semnificative din punct de vedere statistic sunt exprimate ca asteriscuri: *** P 2, F> 3 și F4 comparativ cu pacienții, iar ciroza a fost 0, 737, 0, 749, 0, 801 și 0, 807 (Tabelul 4). Calculul raportului sAxl/albumină a crescut ASC la 0, 783, 0, 766, 0, 826 și 0, 831 (Tabelul 4, Figura suplimentară 1). Raporturile sAxl/albumină în funcție de gradul de fibroză și ciroză sunt prezentate în figurile 2a și d.

Tabel în dimensiune completă

Nivelurile sAxl/albuminei serice, nivelurile serice ELF ™ și rezultatele fibroscanului stratificate prin biopsie hepatică ( A - c ), precum și stratificat prin prezența cirozei pe baza rezultatelor testelor imagistice ( d - f ). Diferențele statistice semnificative sunt exprimate ca asteriscuri: *** P 3, F4 și ciroză comparativ cu ELF ™ (Figura 3, Tabelul 4), precum și TE (Tabelul 4). Coeficienții de corelație Spearman sAxl cu raportul sAxl/albumină, ELF și TE au fost de 0,969 (P

Comparația preciziei diagnostice afișate ca zonă sub curba (ASC) a testului sAxl/albumină și ELF pentru fibroza semnificativă (F ≥ 2; ( A ) fibroză avansată (F ≥ 3; ( b ) fibroza gradul 4 (F4; ( c ) și ciroză hepatică așa cum se arată ( d )

Imagine la dimensiune completă

Raportul sAxl și sAxl/albumină este independent de sex și IMC

Raportul dintre sAxl și sAxl/albumină a fost independent de sex (media sAxl [IQR]: bărbat versus femeie: 46, 1 [37, 7; 58, 1] versus 43, 82 [35, 48; 61, 15], P = 0,518; median sAxl/albumina [IQR]: 1,0 [0,83 1,32] vs. 1,0 [0,80; 1,50], P = 0,683). În plus, raportul dintre sAxl și sAxl/albumină a fost independent de categoria IMC. Un total de 35,7% (n = 140/392) dintre pacienți au avut greutate normală (IMC 23, 25, precum și fibroză hepatică avansată și ciroză. În acest studiu, ne-am concentrat pe investigarea preciziei diagnostice a sAxl ca biomarker pentru și fibroza hepatică avansată în Acest studiu a confirmat sAxl ca un biomarker precis al cirozei hepatice, iar precizia sa de diagnostic ar putea fi îmbunătățită în continuare prin calcularea unui raport sAxl/albumină de ASC 0, 826 pentru diagnosticul F4. 1, 29 o sensibilitate de 77, 8 și o specificitate de 78, 5. În special, sAxl și sAxl/albuminratio au fost independenți de sex și IMC.

Axl este membru al subfamiliei TAM (Tyro3, ​​Axl, Mer) a receptorilor tirozin kinaze și este încă cunoscut că este implicat în dezvoltarea cancerului și chimiorezistența mediată. Pe lângă faptul că afectează supraviețuirea, proliferarea, migrația și angiogeneza celulară, Axl joacă, de asemenea, un rol în îndepărtarea celulelor apoptotice, agregarea trombocitelor și reglarea producției de citokine proinflamatorii. 27, 28 După scindarea proteolitică, domeniul extracelular al Axl este eliberat în sânge numit Axl solubil (sAxl). S-a dovedit a fi crescut în ser sau plasmă în mai multe boli, cum ar fi anevrismul aortic, insuficiența cardiacă, boala arterelor periferice, IRC, lupus eritematos sistemic, artrita reumatoidă și preeclampsie. 30, 31, 32, 33, 34, 35 În plus, grupul nostru a demonstrat că sAxl este eliberat predominant de miofibroblaste hepatice, care sunt în general asociate cu progresia fibrozei hepatice. Aceste constatări au fost în concordanță cu un studiu recent care arată că Axl este implicat în progresia fibrozei hepatice într-un model de șoarece knockout Axl, demonstrând că semnalizarea Axl prin stop specific de creștere este necesară pentru activarea celulelor stelate hepatice. 20

Acesta este primul studiu care compară acuratețea diagnosticului sAxl ca biomarker neinvaziv al fibrozei hepatice cu testul ELF-TE. Ultimele două sunt cele mai evaluate teste neinvazive pentru fibroza hepatică și au fost comercializate. Rezultatele studiului nostru corespund bine cu rapoartele anterioare privind acuratețea diagnosticului testului ELF-TE. 2, 6, 8 Cu toate acestea, ambele teste au dezavantajul costurilor ridicate. În plus, TE are limitări de aplicabilitate, deoarece rezultatele fiabile nu pot fi obținute la până la 15,8% dintre pacienți, în principal din cauza obezității, prezenței ascitei sau a experienței operatorului mai puțin. 8, 36, 37 Din acest motiv, 14,4% din testele TE din grupul nostru au trebuit excluse din analiză.

În schimb, sAx1 este un marker seric stabil care poate fi ușor măsurat prin test imunosorbent legat de enzime (ELISA) la un cost redus. Recent, am înregistrat precizia diagnosticului cu ASC 0,918 (cut-off 53, 89 ng/ml) pentru detectarea F ≥ 3 și ASC 0,935 (cut-off 54, 0 ng/ml) pentru detectarea F4 în plasmă. 190 de pacienți cu afecțiuni hepatice cronice comparativ cu controalele sănătoase. În studiul nostru, am inclus 360 de pacienți cu boli hepatice cronice, precum și 31 de controale sănătoase și ne-am concentrat pe discriminarea fibrozei semnificative până la cele avansate sau a cirozei din stadiile inferioare ale fibrozei sau a unei afecțiuni sănătoase. sAxl a atins astfel o ASC de 0,801 (limită de 52, 98 ng/ml) în identificarea pacienților cu F4. Precizia diagnosticului a fost crescută la AUC 0,826 (cut-off 1,29) pentru detectarea F4 (metoda de referință a biopsiei hepatice) și AUC 0,832 (cut-off 1,29) pentru detectarea cirozei hepatice (afișarea metodei de referință) prin adăugarea de ser total albumină în model. Folosind aceeași valoare limită de 1,29, ASC pentru detectarea fibrozei semnificative (F> 2), fibroza avansată (F> 3) și F4 a fost 0, 763, 0, 766 și 0, 826. 1, 29, PPV și VAN pentru detectarea F4 au fost 46, respectiv 2. 93,9%, excluzând astfel în mod fiabil prezența F4.

În acest context, trebuie să luăm în considerare faptul că utilizarea biopsiei hepatice ca metodă de referință, deși un standard de aur, poate duce automat la o subestimare a biomarkerilor neinvazivi (ASC 39, 40

Mai mult, s-a dovedit că etiologia bolilor hepatice este un factor major care influențează performanța markerilor neinvazivi ai fibrozei. În special în bolile hepatice colestatice, cum ar fi PBC și PSC, datele privind evaluarea neinvazivă a fibrozei sunt limitate. În plus, sistemele clasice de notare histologică, cum ar fi sistemele Ludwig, fibroza pot fi abordate parțial doar prin etapele 3 și 4 (ref. 42, 43). În studiul nostru, raportul sAxl/albumină a arătat niveluri de tăiere inconsistente într-o cohortă de pacienți cu AIH/CLD/Suprapunere cu o valoare limită de 3,66 pentru ≥F3, dar o limită de 1,6 pentru diagnosticul de F4, care poate reflecta tendința mărimii eșantionului, deoarece doar 4 pacienți din acest grup au fost clasificați ca F3 în histologia ficatului.

În cele din urmă, raportul sAxl/albumină este un marker precis al fibrozei hepatice avansate și al cirozei în NAFLD și hepatită virală. Datorită ușurinței sale de utilizare și a costului redus, este potrivit ca parametru de screening pentru fibroza hepatică și ciroză semnificativ avansată, mai ales atunci când TE nu este disponibil sau nu poate fi utilizat. Acuratețea diagnosticului sAxl în AIH și boala hepatică colestatică trebuie confirmată la diferite cohorte de pacienți.

Materiale și metode

Populația de studiu

Testele de fibroză hepatică comercializate

Testul ELF a fost măsurat în ser pe un sistem ADVIA Centaur Immunoassay conform protocolului producătorului (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., NY, SUA). TE folosind Fibroscan® (Echosens, Paris, Franța) a fost efectuat pe stomacul gol și conform instrucțiunilor producătorului. Rezultate care arată 23, 38

analize statistice

Variabilele cantitative au fost exprimate ca mediană cu intervalul intercuartil (IQR) și comparate prin teste U Mann-Whitney. Variabilele calitative au fost descrise folosind frecvențe absolute și relative și comparate folosind testele exacte ale lui Chi-Square sau Fisher. Compararea a mai mult de două grupuri a fost efectuată folosind testul Kruskal Wallis. Coeficientul de corelație Spearman a fost utilizat pentru a evalua corelația dintre toate testele neinvazive utilizate. Precizia sAxl a fost determinată de ASC pentru a prezice (1) fibroză semnificativă (≥F2), (2) fibroză avansată (≥F3), 3) F4 și (4) ciroză hepatică, așa cum se arată în (A) un marker și în combinație cu niveluri serice de albumină (mg/dl; exprimate ca raport sAxl/albumină). Indicele Youden a fost calculat pentru a identifica valorile limită optime. În plus, s-au calculat sensibilitatea, specificitatea, PPV și VAN. Valorile P