abstract

Pentru a investiga efectele împotriva obezității extractului de rodie (PLE) într-un model de obezitate la șoarece indus de o dietă bogată în grăsimi și hiperlipidemie.

proiecta:

Pentru experimentul anti-obezitate, șoarecii ICR și șoarecii masculi ICR au fost hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi pentru a induce obezitatea. Când greutatea grupului cu conținut ridicat de grăsimi a fost cu 20% mai mare decât cea a grupului cu diete normale, animalele au fost tratate cu 400 sau 800 mg/kg/zi PLE timp de 5 săptămâni. Greutatea corporală și aportul zilnic de alimente au fost măsurate în mod regulat în timpul perioadei experimentale. După 5 săptămâni, au fost tratate diferite tampoane adipoase și s-au măsurat colesterolul total seric (TC), trigliceridele (TG), glucoza și lipoproteinele cu densitate ridicată (HDL-C) după PLE. În experimentul de absorbție a grăsimilor, atât șoarecii normali, cât și cei obezi au primit 0,5 ml de emulsie lipidică și PLE la o doză de 800 mg/kg în același timp. Nivelurile serice de TG în ser au fost măsurate la 1, 2, 3, 4 și 6 ore după tratament. TG-urile din excrețiile fecale au fost măsurate după administrarea orală a emulsiei lipidice la șoareci. Efectele PLE și ale compușilor săi izolați (acid ellagic și acid tanic) asupra activității lipazei pancreatice au fost investigate in vitro .

rezultatele:

Grupurile tratate cu PLE au arătat o scădere semnificativă a greutății corporale, a aportului de energie și a diferitelor procente de greutate grasă și serică, TC, TG, niveluri de glucoză și raport TC/HDL-C după 5 săptămâni de tratament. În plus, PLE a redus semnificativ creșterea nivelului seric de TG și a inhibat absorbția grăsimii intestinale la șoareci, având emulsia de grăsime pe cale orală. PLE a arătat o diferență semnificativă în reducerea gustului la șoarecii obezi hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi, dar nu a arătat niciun efect la șoarecii hrăniți cu o dietă normală.

concluzie:

PLE poate inhiba dezvoltarea obezității și hiperlipidemiei la șoarecii obezi cu conținut ridicat de grăsimi. Efectele par a fi mediate parțial de inhibarea activității lipazei pancreatice și suprimarea absorbției energiei. PLE poate fi un nou inhibitor al apetitului care afectează doar obezitatea cauzată de o dietă bogată în grăsimi.

Obezitatea este cea mai răspândită boală metabolică în țările dezvoltate și a devenit o epidemie globală în ultimii ani. 1 Este asociat cu diferite boli cronice, inclusiv hiperlipidemie, diabet zaharat, boli coronariene și anumite tipuri de cancer. În plus, obezitatea, în special obezitatea abdominală, este asociată cu dislipidemie, care se caracterizează prin creșterea trigliceridelor (TG) și scăderea nivelului lipoproteinelor de colesterol cu ​​densitate ridicată (HDL-C). Se știe că aportul excesiv de grăsime este asociat cu dezvoltarea obezității la șoareci. Hrănirea prelungită cu o dietă bogată în grăsimi poate provoca obezitate cu hiperfagie, hipergluconemie, hiperlipidemie și rezistență la insulină. 4, 5 În plus, se crede că obezitatea cauzată de o dietă bogată în grăsimi poate contribui la creșterea creșterii adipocitelor albe și maronii. 6

experimental

Șoareci CD-1 (ICR) de sex feminin și masculin (vârsta de 3 săptămâni) au fost obținuți de la Beijing Vital River Laboratory Animal Technological Company (Beijing, China). Au fost adăpostiți timp de 1 săptămână pe un ciclu de lumină/întuneric de 12/12 h într-o cameră controlată de temperatură și umiditate și au fost hrăniți cu apă standard de laborator, după cum este necesar. Furajele standard de laborator conțin (în procente în greutate) aproximativ: 4% grăsimi, 24% proteine, 65% carbohidrați și o dietă bogată în grăsimi: 15% untură (grăsimi saturate), 20% ulei de măsline (grăsimi polinesaturate), 35% grăsimi. % proteine, 15% carbohidrați, 0,5% amestecuri de vitamine, 3% amestecuri minerale și 5% colesterol (în principal gălbenuș de ou). Ambii pui au fost obținuți și de la Institutul pentru animale de laborator al Academiei Chineze de Științe Medicale (SCXK Jing 2001-0003).

materiale

PLE (conținând 10,6% acid elagic, preparat în laboratorul nostru cu numărul de acces 040818) a fost utilizat și o probă de cupon (031006) a fost stocată în laboratorul nostru pentru utilizare ulterioară. Kituri de testare TG, glucoză, HDL-C și TC au fost achiziționate de la Beijing Zhongsheng High-tech Bioengineering Company (Beijing, China). Emulsia lipidică a fost achiziționată de la Beijing Green Cross Company (Beijing, China).

metode

Efectele PLE asupra obezității la șoareci induse de o dietă bogată în grăsimi

Efectul PLE asupra apetitului la șoarecii hrăniți cu o dietă normală sau bogată în grăsimi

Șoarecii au fost împărțiți în mod aleatoriu în patru grupuri (șapte șoareci masculi și șapte șoareci femele pe grup): dieta bogată în grăsimi și grupul PLE, grupul controlat cu grăsimi ridicate, grupul cu dietă normală plus grupul PLE și grupul cu dieta normală. Grupurile PLE au fost administrate oral prin gavaj PLE la o doză de 800 mg/kg/zi timp de 5 săptămâni. Greutatea corporală și aportul de alimente au fost monitorizate săptămânal. Lungimea corpului a fost măsurată și diferite tampoane de grăsime au fost îndepărtate la sfârșitul acestui experiment.

Efectele PLE asupra nivelurilor serice de TG la șoareci normali după o singură administrare orală a unei emulsii lipidice

Șoarecii masculi ICR (20,03 ± 1, 97 g) au fost împărțiți în trei grupuri, fiecare grup corespunzător greutății corporale (n = 6). Emulsia lipidică a fost preparată cu 5 ml ulei de măsline și 10 ml soluție 1% Tween-20 sonicată timp de 10 minute. După ce toți șoarecii au postit timp de 12 ore, au primit o emulsie lipidică orală la o doză de 0,5 ml/șoarece (conținând 0,046 mmol TG). În același timp, grupul PLE a primit PLE oral la o doză de 800 mg/kg, grupul acid tanic a primit acid tanic la o doză de 200 mg/kg, iar grupul martor a primit același volum de apă. Probele de sânge seriale au fost prelevate din sinusul orbital la 0, 1, 2, 4 și 6 ore după administrarea emulsiei lipidice. Serul a fost separat prin centrifugare la 4 ° C și depozitat la -20 ° C pentru testul TG ulterior.

Efectele PLE asupra nivelurilor serice de TG la șoareci obezi după administrarea orală a unei emulsii lipidice

Șoarecii ICR obezi induși de o dietă bogată în grăsimi (bărbați, 39, 9 ± 2,77 g) au fost împărțiți în două grupuri, un grup PLE și un grup control, fiecare grup corespunzător greutății corporale (n = 6). Grupul normal a fost hrănit cu chow de laborator standard. Emulsia lipidică a fost preparată așa cum s-a descris mai sus. După gavajul gastric al emulsiei lipidice (0,5 ml/șoarece), grupului PLE i s-a administrat PLE la o doză de 800 mg/kg, iar grupului control obez și grupului normal li s-a administrat ser fiziologic normal. Probele de sânge seriale au fost prelevate din sinusul orbital în timp ce șoarecii au fost anesteziați cu eter la 0, 1, 2, 4 și 6 ore după administrarea emulsiei lipidice. Serul a fost separat prin centrifugare la 4 ° C și depozitat la -80 ° C pentru analize ulterioare.

Efectele PLE asupra absorbției totale a grăsimilor la șoareci normali după o singură administrare orală a unei emulsii lipidice

Șoarecii masculi ICR (19, 56 ± 1, 48 g) au fost împărțiți în patru grupuri (n = 6). După 12 ore de post, au primit emulsia lipidică prin gavaj la o doză de 0,5 ml/șoarece. Emulsia lipidică a fost preparată așa cum s-a descris mai sus. În același timp, când grupul PLE a primit PLE oral la o doză de 800 mg/kg, grupul acid tanic a primit acid tanic la o doză de 200 mg/kg, grupul acid elagic a primit acid elagic la o doză de 200 mg/kg. 80 mg/kg și grupul martor au primit același volum de apă. Ulterior, chow standard pentru rozătoare a fost administrat la 1,0 g/șoarece. Fecalele au fost colectate pentru următoarele 12 ore și uscate la aer peste noapte la temperatura camerei. Fiecare probă fecală a fost cântărită și măcinată până la pulbere. Cantitatea de grăsime din fecale a fost analizată conform metodei Kamera și colab. 18 și absorbția grăsimilor din dietă a fost exprimată ca procent din grăsimile ingerate.

Efectele PLE asupra activității lipazei pancreatice in vitro

Activitatea lipazei pancreatice a fost determinată prin măsurarea ratei de eliberare a acidului gras liber din TG. Mai întâi, emulsia lipidică a fost diluată cu tampon Tris-HCI 0,1 M (pH 8, 4) pentru a da o concentrație finală de 30 μM TG. Emulsia diluată (0,1 ml) a fost incubată cu 0,05 ml de lipază pancreatică (concentrație finală 5 U pe tub) și 0,1 ml de diferite concentrații de soluții de probă timp de 15 minute la 37 ° C. Activitatea lipazei pancreatice a fost determinată ca milimoli de grăsime de acid eliberat per mililitru de amestec de reacție. Rata de eliberare a acidului gras este descrisă în altă parte. 19

analize statistice

Toate valorile sunt raportate ca media ± SD. Comparația statistică între grupurile de șoareci a fost calculată utilizând software-ul SPSS. Analiza varianței cu testul Dunnett a fost utilizată pentru analiza datelor, iar criteriul semnificației statistice a fost P

dovezi

Efectele PLE asupra greutății corporale la șoarecii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi timp de 5 săptămâni. ( A ) Șoareci masculi n = 6; ( b ) șoareci femele (n = 5, grupul 5 avea patru șoareci). Grupa 1: dietă bogată în grăsimi; grupa 2: dietă bogată în grăsimi plus PLE 800 mg/kg; grupa 3: dietă bogată în grăsimi plus PLE 400 mg/kg; grupa 4: dietă bogată în grăsimi și sibutramină 4,6 mg/kg; grupa 5: dieta normală. * P ** P

Efectele PLE asupra concentrațiilor serice de TG la șoareci normali după administrarea orală de emulsie lipidică (n = 6). (Pătrat) grup de emulsii lipidice; (cerc) emulsie lipidică plus grupa PLE 800 mg/kg; (triunghi) Emulsie lipidică plus acid tanic 200 mg/kg. * P ** P

Efectele PLE asupra concentrației serice de TG la șoareci obezi după administrarea orală a emulsiei lipidice (n = 6). (Pătrat) grup bogat în grăsimi; (cerc) grup dietetic normal; (triunghi) Dieta bogată în grăsimi plus grupa PLE 800 mg/kg. * P ** P 2 PLE a redus atât dislipidemia, cât și factorii de risc cardiovascular ai obezității, deoarece au arătat o scădere deosebit de semnificativă a procentelor în greutate ale nivelurilor de grăsime abdominală și TG serice, comparativ cu șoarecii martori.

Acest studiu a arătat, de asemenea, că PLE poate fi un nou supresor avansat al consumului de energie. La șoarecii obezi, cu conținut ridicat de grăsimi, cu conținut ridicat de grăsimi, efectul PLE asupra aportului de energie a fost similar cu efectul de suprimare a apetitului sibutraminei utilizat în clinică. PLE ar putea reduce semnificativ aportul caloric la șoarecii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi; în același timp, însă, gustul PLE la șoarecii hrăniți cu o dietă normală nu a fost cel mai puțin afectat de PLE. Când am monitorizat activitatea zilnică a șoarecilor, am constatat că grupurile PLE erau mai puțin active decât grupurile de sibutramină. El a sugerat, de asemenea, că mecanismul de acțiune al PLE asupra suprimării poftei de mâncare poate fi diferit de cel al sibutraminei. Ipotezăm că ar putea avea o afinitate strânsă pentru obezitate cauzată de o dietă bogată în grăsimi. Mecanismul exact de acțiune al PLE asupra apetitului la șoarecii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi este încă necunoscut și sunt necesare investigații suplimentare.

În concluzie, PLE a avut efecte semnificative asupra inhibării dezvoltării obezității și hiperlipidemiei la șoarecii obezi hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi. S-a sugerat că suprimarea aportului de energie și inhibarea absorbției intestinale a grăsimilor din dietă prin inhibarea activității lipazei pancreatice ar putea fi două mecanisme posibile pentru efectul anti-obezitate al PLE.