rezumat

orizont

Context: Rolul mastocitelor în bolile alergice este bine cunoscut. Datorită funcției lor de inițiere și reglare în patogeneza reacției inflamatorii, este posibil să se aștepte prezența lor la locul inflamației mucoasei tractului digestiv.

Scop: Autorii s-au concentrat pe studiul prezenței și distribuției mastocitelor în materialele de biopsie din esofagul copiilor cu diagnostic clinic de boală de reflux gastroesofagian.

Set și metode: La 40 de pacienți cu vârsta cuprinsă între 5 și 19 ani cu diagnostic clinic de reflux gastroesofagian, am efectuat și o biopsie a mucoasei esofagiene în timpul gastrofibroscopiei. Mastocitele din materialele de biopsie din esofagul copiilor au fost descrise prin metoda fluorocromiei acridin portocalii și examinate la microscopul de fluorescență.

Rezultate: mastocitele din materialele investigate au reprezentat o populație de celule variabilă și chiar destul de bogată. Cea mai frecventă apariție a acestora a fost observată în gama papilelor vasculare ramificate ale laminei proprii. Cea mai bogată reprezentare a acestor elemente celulare s-a găsit întotdeauna în lamina propria mucoasă, în special în vecinătatea profilelor vasculare cu pereți subțiri, resp. venul. În mod evident, apariția celulelor mastocite în stratul epitelial al mucoasei esofagiene a fost înregistrată în 17 cazuri; a fost o combinație cu eozinofilie la copiii cu diagnostic clinic de reflux gastroesofagian (8 pacienți), atopie (4 pacienți) și alte boli ale tractului gastro-intestinal (5 pacienți). Mastocitele sunt o sursă extrem de bogată de modulatori locali în schimbări de flux și modificări proliferative în imediata lor vecinătate.

Concluzie: Cartografierea distribuției mastocitelor în esofagul copiilor poate fi complementară corpului de cunoștințe despre sursele locale de molecule de semnalizare. Prezența mastocitelor poate fi una dintre primele modificări minime ale mucoasei în esofagita microscopică. Valoarea predictivă potențială trebuie verificată la o cohortă mai mare de pacienți.

Cuvinte cheie: mastocite - esofag - reflux gastroesofagian - eozinofilie - esofagită - copii.

Lek Obz, 59, 2010, nr. 6, 226 - 230.

rezumat

Context: Rolul mastocitelor în bolile alergice este bine cunoscut. Datorită inițierii și rolului lor de reglementare în patogeneza reacțiilor inflamatorii, se poate aștepta să își continue prezența în locul inflamației mucoasei din tractul digestiv.

Obiectiv: Scopul studiului este de a descrie prezența și distribuția mastocitelor în materialul de biopsie esofagiană de la copii cu diagnostic clinic de reflux gastroesofagian (GER).

Pacienți și metode: 40 de pacienți cu vârsta cuprinsă între 5-19 ani cu durere epigastrică și semne clinice de reflux gastroesofagian au fost îndrumați pentru gastrofibroscopie cu biopsie esofagiană Mastocitele din materialul de biopsie au fost prezentate cu fluorocrom acridină portocalie și examinate cu microscop fluorescent.

Rezultate: doar 10 copii cu simptome de GER au fost prezenți cu esofagită microscopică, conform Kelly.

Cu toate acestea, prezența mastocitelor în mucoasă sau submucoasă a fost detectată la 27 de copii. Mai mult, combinația de mastocite și eozinofile în biopsie a fost găsită la 8 pacienți. Dintre acestea, doar 5 au fost prezente cu esofagită microscopică. Descoperirile noastre arată că copiii cu simptome subiective ale GER nu s-au corelat adesea cu descoperirile histopatologice clasice ale esofagitei, ci s-au corelat cu un număr crescut de mastocite și eozinofile. Acestea sunt probabil importante în percepția subiectivă a simptomelor GER.

Concluzie: Cartarea distribuției mastocitelor în esofagul copiilor poate fi o completare în setul de cunoștințe despre sursele locale de molecule de semnal. Prezența mastocitelor poate fi printre primele modificări minime ale mucoasei în esofagita microscopică. Puterea predictivă potențială a acestei descoperiri ar trebui verificată de un grup mai mare de pacienți.

Cuvinte cheie: mastocite, esofag, reflux gastroesofagian, eozinofilie, esofagită, copii.

Lek Obz, 59, 2010, 6, p. 226 - 230.

Rolul mastocitelor (MC) în bolile alergice este bine cunoscut. Datorită funcției lor de inițiere și reglare în patogeneza reacției inflamatorii, este posibil să se aștepte prezența lor și la locul inflamației mucoasei tractului digestiv. Numeroase lucrări demonstrează prezența MC în materialul histologic, de ex. gastrită cronică (28, 29) sau boala Crohn (15, 26). Rolul mastocitelor în afectarea esofagiană indusă de acid (1, 2, 6, 19) a fost, de asemenea, confirmat în experimente pe animale și, prin urmare, prezența lor în esofagita de reflux bazată pe refluxul gastroesofagian (GER) este probabilă. Lucrarea unor autori indică, de asemenea, legătura strânsă a MC cu sistemul nervos autonom și cota posibilă a efectelor lor, de ex. de asemenea pentru reglarea motilității gastro-intestinale și pentru dezvoltarea tulburărilor funcționale ale tractului digestiv. În plus, mastocitele sintetizează factorul de creștere al sistemului nervos (NGF) (1, 3, 5, 8, 13).

Prezența eozinofilelor în materialele de biopsie din mucoasa esofagiană deja în 1982 Winter și colab. (33) l-au considerat primul marker histologic al refluxului de acid gastric. Potrivit Kelly și colab., În evaluarea descoperirilor microscopice din materialele de biopsie din esofag. (15) evaluează infiltrarea eozinofilă a mucoasei, hiperplazia stratului celular bazal al mucoasei și lungimea papilei vasculare. Examinările histologice ale mucoasei esofagiene fac posibilă diagnosticarea așa-numitelor esofagită microscopică atunci când constatările endoscopice sunt încă negative. În examinarea microscopică a secțiunilor histologice din materialele de biopsie din esofagul copiilor din GER, o mare importanță diagnostic este atribuită unei incidențe mai mari a leucocitelor eozinofile atât în ​​epiteliul scuamos, cât și în lamina propria mucoasă și lamina muscularis mucoase. Cu toate acestea, în materialele de biopsie din esofag, chiar și cu modificări inflamatorii minime ale mucoasei esofagiene la astfel de copii bolnavi, poate fi demonstrată apariția MC în aceeași topografie (8, 14, 32).

Apariția MC în esofag este descrisă în principal la animale (2), precum și în afectarea experimentală a esofagului de către acid (10, 24). Arestarea MC este, de asemenea, bine cunoscută în mai multe boli ale tractului digestiv, de ex. în alergii alimentare (1, 9, 25, 31), hipereozinofilie (19, 20, 26) sau reacții parazitare (19, 21), dar și în alte nereguli ale motilității gastrointestinale (19). Aceste fapte ne-au determinat să luăm în considerare rolul mastocitelor în mucoasa esofagiană la copiii cu boli ale tractului digestiv, în special cu reflux gastroesofagian și să le determinăm în probele de biopsie. Prin urmare, în munca noastră am acordat o atenție specială acestei populații de celule.

Autorii s-au concentrat pe studiul prezenței și distribuției mastocitelor în materialele de biopsie din esofagul copiilor cu diagnostic clinic de boală de reflux gastroesofagian.

Într-un grup de 40 de copii (20 de băieți și 20 de fete cu vârste cuprinse între 5 și 19 ani) cu durere abdominală epigastrică și cu semne clinice de reflux gastroesofagian, am determinat, de asemenea, prezența esofagitei de reflux microscopic în gastroesofagoduodenoscopie. Biopsiile de prindere au fost luate din partea inferioară a esofagului cu dispozitivul Olympus GIF E. În evaluarea prezenței esofagitei microscopice în materialele de biopsie din esofagul copiilor, am folosit o schemă de clasificare conform Kelly și colab.:

A. Indicatori ai activității inflamației epiteliale:
Gradul 0 - fără neutrofile, exsudate, eroziuni, ulcere,
1 - neutrofile prezente în epiteliu mai puțin de 20%, fără eroziuni, ulcere,
2 - neutrofile prezintă în epiteliu peste 20% și/sau eroziuni sau exulcerații.
B. Lungimea papilei vasculare:
Gradul 1 - mai puțin de 1/3 din distanța de la bază la suprafața epitelială,
2 - mai mult de 1/3, dar mai puțin de 2/3 din distanța de la bază la suprafața epitelială,
3 - mai mult de 2/3 din distanța de la bază la suprafața epitelială.
C. Cantitatea de celule prezente în zona bazală:
Gradul 0 - grosimea a 1-2 straturi de celule bazale,
1 - mai mult decât grosimea a 2 straturi de celule, dar mai puțin de 20% din grosimea totală a epiteliului,
2 - mai mult de 20%, dar mai puțin de 50% din grosimea epitelială totală,
3 - mai mult de 50% din grosimea epitelială totală.

În descrierea MC în acest organ, am preferat metoda fluorocromiei acridinei portocalii a lui Jagatic și Weiskopf (12), deoarece permite identificarea fiabilă a MC chiar și în materialele histologice fixate în formaldehidă și în parafină. Pentru a arăta eozinofile, secțiunile au fost colorate în continuare cu hematoxilină-eozină și Giems-Romanovsky. Am efectuat examinări microscopice și documentație fotografică pe un dispozitiv microscopic Jenalumar 2 (Zeiss, Jena, Germania).

Am examinat probe de biopsie de la 40 de pacienți cu durere epigastrică și semne clinice de reflux gastroesofagian. Cu toate acestea, 27 dintre aceștia aveau GER, fără o constatare endoscopică a esofagitei de reflux.

La 10 pacienți cu semne clinice de reflux gastroesofagian, esofagita nu a fost confirmată, dar gastridita cronică superficială, la alți 2 copii micoza intestinală și la un copil afecțiunea a fost închisă ca dispepsie funcțională fără constatări patologice endoscopice și histologice.

În general, mastocitele (MC) din probe au reprezentat o populație de celule destul de bogată. Au apărut ca celule polimorfe, și anume ovale, trapezoidale, neregulate poligonale sau în formă de stea. În epiteliul scuamos stratificat, apariția lor a fost foarte variabilă, mai degrabă sub formă de elemente celulare individuale în întregul epiteliu, inclusiv straturile sale bazale. Mastocitele au fost observate în principal în papilele vasculare ale mucoasei laminei proprii, atât sub formă de celule individuale, cât și în grupuri mai mici. În straturile mai profunde (lamina muscularis mucosae) au fost observate de obicei doar mastocite neregulate individuale.

Dintre toți pacienții cu suspiciune clinică de GER (indiferent de negativitatea endoscopică a esofagitei), Kelly a avut esofagită microscopică la 10 pacienți, 1 moderat și 9 ușor. La toți acești pacienți, mastocitele erau prezente în epiteliu și în lamina musculară și lamina propria mucoasă, iar la 5 pacienți eozinofilele erau prezente și în epiteliul scuamos (Fig. 1).

În materialele de biopsie investigate din mucoasa esofagului copiilor, am găsit modificări destul de nesemnificative în stratul epitelial. Prezența leucocitelor eozinofile în epiteliul scuamos stratificat a fost observată în 8 cazuri; a corespuns gradului A-1 (adică mai puțin de 20% din aceste elemente). Nu am detectat apariția exsudațiilor, eroziunilor și ulcerărilor nici măcar o dată. În doar 1 caz au existat semne de leucoplazie circumcriptivă.

Un grup special sunt secțiunile histologice realizate din materiale de biopsie care nu conțineau un strat epitelial, ci doar o submucoasă și lamina propria mucoasă. În aceste cazuri, MC a fost raportat la toți cei 13 pacienți.

În grupul examinat, nu am găsit o corelație pozitivă între incidența GER și MC (doar 55% dintre pacienți au observat prezența MC). În schimb, la 10 pacienți cu GER și esofagită microscopică minimă, MC au fost prezenți în materialele histologice examinate (adică 100% dintre pacienți) și au fost întotdeauna găsiți în epiteliul scuamos stratificat.

Diagnosticul esofagitei microscopice în GER nu este ușor. Rezultatele investigațiilor clinice se corelează de obicei cu constatările din materialele pentru biopsie. Natura și intensitatea modificărilor histologice demonstrate au fost acum în mare parte standardizate pe baza înregistrării corecte cantitative și calitative a descoperirilor histologice în epiteliul însuși și în lamina propria mucoasă, resp. la muscularis mucoase (4, 15). Prezența leucocitelor eozinofile și neutrofile, în special eroziuni superficiale sau ulcere, nu necesită comentarii speciale cu privire la aceste modificări reactive (7, 29). Cu toate acestea, există și astfel de autori (3) care afirmă că rezultatele chiar și ale unui singur eozinofil în epiteliu la 1 mm2 pot fi considerate ca un semn evident al esofagitei. Alți autori (15) consideră acumularea de leucocite eozinofile în straturile subepiteliale ale peretelui esofagian drept dovezi convingătoare ale acestor modificări inflamatorii (22).

O condiție prealabilă pentru o evaluare adecvată a descoperirilor noastre histologice a fost materialele de biopsie, în care mai mult sau mai puțin toate straturile mucoasei și submucoasei au fost ideal capturate, astfel încât atât straturile epiteliale, cât și înălțimea papilelor vasculare să poată fi evaluate corect. Din acest aspect, pentru constatările noastre despre o apariție mult mai frecventă a MC decât leucocitele eozinofile în epiteliu, nu s-a găsit niciun acord în literatura de care dispunem, deși nu există nicio referință pentru un rol semnificativ al MC în modificările microcirculației mucoasei esofagul după arsuri acide experimentale la animale (2, 9, 24), inclusiv acțiunea sucului gastric la om-

acestea includ, de asemenea, efectele substanțelor eliberate din MC, neurotransmițători, histamină și oxid de azot asupra modificărilor acidității în esofagul distal (2, 3, 24). Studiile cantitative (3, 10) la câini și șobolani indică efectele acidității asupra scurtării musculaturii peretelui esofagian; autorii afirmă că modificarea acidității intralumatice este asociată cu degranularea MC sau liză celulară esofagiană, care, potrivit autorilor, ar putea juca un rol important în fiziopatologia fenomenelor de reflux. În opinia noastră, acesta este un fapt deosebit de remarcabil, deoarece MC sunt ambele o sursă extrem de bogată de „hormoni multipli” (al căror microambient) (27) și sunt considerați modulatori importanți în timpul schimbărilor de alterare și proliferare a fluxului în imediata lor vecinătate. În plus, în diferite situații patologice, este subliniată legătura lor cu funcțiile leucocitelor eozinofile (25).

Prezența eozinofilelor în GER, după cum a subliniat mai mulți autori (1, 4 - 6, 12, 17), poate fi, de asemenea, considerată ca un semn al predispoziției alergice a pacienților, resp. pentru o parte din imaginea așa-numitei alergii la mancare. Alți autori (30) raportează o corelație pozitivă de până la 86% a incidenței Helicobacter pylori și MC în modificările inflamatorii ale mucoasei gastrice la copii.

Setul de factori care sunt implicați direct sau indirect în reglarea creșterii, diferențierii, vitalității sau posibilei transformări post-diferențiale a MC este, fără îndoială, foarte complicat. La urma urmei, de ex. factorul de creștere a nervilor, care este sintetizat în țesuturile deteriorate, acționează ca un factor care stimulează creșterea selectivă nu numai asupra componentelor nervoase locale și MC, ci și asupra altor populații de celule învecinate (11).

La evaluarea posibilelor efecte patogene ale MC într-un context dat, merită menționat și efectele altor produse ale acestor celule. În primul rând, este histamina, care poate juca mai multe roluri ca stimulator al activității celulare mitogene locale, inclusiv MC și proliferarea fibroblastelor (4, 31). Mai mult, heparina participă foarte eficient la restituirea electronegativității naturale a suprafeței interioare a vaselor de sânge în zonele cu epiteliu deteriorat (26). Există chiar opinii că chimazele și triptazele, care sunt coordonate cu histamina la activarea MC, potențează efectele periferice ale acestei amine (11, 10, 26, 27).

În legătură cu tulburările funcționale ale esofagului, nu poate fi subestimat nici faptul că MC din lamina propria mucoasă se află în contact strâns cu părți ale sistemului nervos autonom. Sunt de părere că relațiile microanatomice dintre MC și nervii enterali pot fi considerate drept dovezi ale multor interacțiuni, atât în ​​reglarea proceselor imune, cât și în starea celulară a unei regiuni (19). Mediatorii eliberați de MC ar putea provoca modificări mediate de nervi, de ex. datorită modificărilor în transportul ionilor, inclusiv Cl- (1, 2, 6). Prin urmare, considerațiile posibilelor efecte neuronale modulate asupra mișcărilor mecanice reflexe în timpul trecerii prin esofag nu ar trebui să lipsească în contextul dat.

Pe baza constatărilor noastre la 10 pacienți cu diagnostic de GER și semne de esofagită histologică minimă, unde MC au fost prezenți în epiteliul scuamos stratificat la toți pacienții, precum și rezultatele lucrărilor experimentale ale autorilor la animale (2, 19, 24), se poate considera că imaginea modificărilor provocate de reflux ale mucoasei esofagiene include și mobilizarea MC cu toate consecințele acțiunii potențiale a mediatorilor eliberați din acestea. Cartografierea distribuției MC în esofagul copiilor ar trebui înțeleasă ca un complement în corpul de cunoștințe despre sursele locale de molecule de semnalizare chimică. Aceștia sunt utilizați, de asemenea, în microambientul organului ca factori de reglare în cadrul sesiunilor imuno-neuro-umorale existente, atât în ​​circumstanțe fiziologice, cât și patologice.

Distribuția mastocitelor în biopsia esofagului la copii și adolescenți

1 Milan KUCHTA, 2.4 Mária SIROŤÁKOVÁ, 1.3 Emeše MAJOROVÁ, 3 Natália KUCHTOVÁ
(De la 1II. Departamentul pentru copii și adolescenți, UPJŠ Facultatea de Medicină și Spitalul Universitar pentru Copii, Košice, șef conf. Univ. Dr. M. Kuchta, MD, CSc., De la al doilea departament de medicină experimentală al Facultății de Medicină, UPJŠ, Košice 3Detská fakultní nemocnice, Košice, director: I. Urbančíková, MD, de la Departamentul de histologie și embriologie, Facultatea de Medicină, UPJŠ, Košice, șeful prof. M. Pomfa, MD, CSc.)