celule

  • abstract
  • introducere
  • Noi descoperiri privind limfoamele cu celule B mari bazate pe analiza microarray și studii imunohistochimice
  • GCB similar, ABC similar și tip III DLBCL
  • DLBCL de tip ABC și GCB sunt asociate cu diferite mecanisme oncogene de bază
  • DLBCL de tip ABC și GCB se caracterizează prin diferite modele de dezechilibre cromozomiale
  • Imunohistochimia permite identificarea DLCBL similar cu GCB și ABC?
  • Putem distinge DLBCL similar cu ABC și GCB prin morfologie?
  • Ce entități încă evoluează în cadrul DLBCL ca urmare a acestor studii?
  • DLBCL mare despicat
  • Celula fus axial DLBCL
  • DLBCL imunoblastic
  • FOBCP1-pozitiv DLBCL
  • PMBCL
  • Informații suplimentare despre variantele DLBCL care susțin recunoașterea lor ca entități de limfom
  • ALK + DLBCL
  • Limfoame bogate în celule T/histiocite (THRBCL)
  • DLBCL cu morfologie plastică plasmatică
  • DLBCL care apare în locuri anatomice speciale
  • concluzie

abstract

Limfomul difuz cu celule B mari (DLBCL), așa cum este definit de clasificarea Organizației Mondiale a Sănătății (OMS), este un grup eterogen clinic, morfologic și genetic de proliferări maligne ale celulelor B limfoide mari. Au fost publicate mai multe studii în ultimii 6 ani care îmbunătățesc înțelegerea acestor limfoame. Aceste studii au analizat DLBCL-urile în funcție de profilul lor de expresie genică, au furnizat informații suplimentare cu privire la unele dintre variantele DLBCL-urilor enumerate în clasificarea OMS și au evidențiat influența locului de origine al acestor tumori. Această revizuire rezumă cele mai recente date și examinează impactul acestora asupra recunoașterii noilor entități limfom clinico-patologice.

Limfomul difuz cu celule B mari (DLBCL) reprezintă aproximativ 40% din limfoamele adulte non-Hodgkin. Este un grup de tumori clinic, morfologic și genetic heterogen compus din celule B mari.

În această revizuire, ne vom concentra în special pe aceste date recent publicate și vom examina impactul acestora asupra recunoașterii noilor subiecți clinicopatologici care îndeplinesc principiile „REAL” din cadrul grupului DLBCL.

Noi descoperiri privind limfoamele cu celule B mari pe baza analizei microarray-urilor și a studiilor imunohistochimice

GCB similar, ABC similar și tip III DLBCL

Mai multe studii de microarray 7, 8 efectuate pe DLBCL de novo netratate au identificat două subgrupuri prognostice distincte majore. Ambele au fost caracterizate printr-un profil diferit de expresie genică, fie caracteristic celulelor B germinale normale, fie celulelor B cu memorie sanguină activată. Un subset de celule B asemănătoare germenilor (similar cu GCB) a fost corelat cu un prognostic semnificativ mai bun comparativ cu un subset de celule B activate (ABC). Această semnificație prognostică a fost independentă de indicele prognostic internațional. 7, 8, 9, 10, 11 Nu s-a găsit nicio corelație între aceste subgrupuri de DLBCL și diferitele variante morfologice enumerate în OMS. 7

Al treilea subgrup (tip 3) a inclus cazuri care nu au exprimat gene caracteristice subgrupurilor asemănătoare GCB sau ABC. Acest subgrup a avut un rezultat slab similar cu cel al subgrupului asemănător ABC și este încă prezent și, spre deosebire de subgrupurile asemănătoare GBC și subgrupuri ABC similare, nu a fost studiat în continuare.

DLBCL de tip ABC și GCB sunt asociate cu diferite mecanisme oncogene de bază

Diferența de incidență a rearanjării genei BCL2 a fost arătată între cele două subgrupuri, deoarece s-a constatat că t (14; 18) (q32; q21) apare aproape exclusiv în subgrupul asemănător GCB. 7, 12, 13 Aceste cazuri de rearanjare a genei BCL2 au împărtășit în continuare un profil de expresie genică izbitor de similar, sugerând că acestea reprezintă un subset unic în familia DLBCL asemănătoare GCB. 12

În schimb, activarea căii factorului nuclear kappa B (NF-kB) a fost găsită într-un subgrup asemănător ABC. Într-adevăr, aceste limfoame exprimă gene țintă NF-κB care rezultă din activitatea constitutivă a inhibitorului kinazei kappa B (IκB). Această enzimă fosforilează IκB, un inhibitor al NF-κB, rezultând în degradarea sa proteazomală. Administrarea MLX105, un inhibitor al kinazei Ik B din clasa beta-carbolenă, la liniile celulare DLBCL de tip ABC (dar nu GCB) induce apoptoza (Staudt LM. Ann Oncol 2005; 16 (Supliment 5): v36; abstract; ).

DLBCL de tip ABC și GCB se caracterizează prin diferite modele de dezechilibre cromozomiale

Subgrupul DLBCL conform datelor microarray este susținut de studii comparative de hibridizare genomică și au fost raportate diferite modele de dezechilibre cromozomiale pentru ambele subgrupuri. Tumorile asemănătoare ABC au prezentat adesea trisomia 3, câștiguri de 3q și 18q21 - q22 și pierderi de 6q21 - q22, în timp ce tumorile asemănătoare GCB au prezentat adesea câștiguri de 12q12. 14, 15

Au fost identificate unele dintre genele potențial importante purtate de aceste regiuni cromozomiale.

Gena PRDM1/BLIMP1, un represor transcripțional exprimat într-un subset de celule GCB și celule plasmatice și necesar diferențierii celulare B terminale, se află pe cromozomul 6q21 - q22.2. Expresia proteinei PRDM1/BLIMP1 s-a dovedit a fi absentă în majoritatea cazurilor, altele decât GCB DLBCL, în ciuda prezenței mediatorului ARN PRDM1/BLIMP1. Analiza mutației PRDM1/BLIMP1 sugerează un rol de supresor tumoral al acestei gene, iar inactivarea PRDM1/BLIMP1 poate contribui la limfomageneză prin blocarea diferențierii celulelor B terminale în celule plasmatice. 16, 17

Amplificarea 18q21, care conține gena BCL2, a fost mai frecventă în tumorile ABC (18%) decât în ​​tumorile GCB (5%). Majoritatea cazurilor de GCB-DLBCL cu îmbunătățire 18q21 au avut, de asemenea, translocare t (14; 18).

Deoarece tumorile asemănătoare GCB și ABC provin din celulele B în diferite stadii de diferențiere (celulele germinale în comparație cu celulele medii postgermale), ele aparent utilizează căi oncogene diferite (t (14; 18) (q32; q21) translocații în GCB spre deosebire de la tumori versus activarea căii NF-κB în tumorile asemănătoare ABC) și au rate de supraviețuire diferite, se poate presupune că ambele subgrupuri definite molecular reprezintă entități de boală diferite.

Interesant, o predominanță semnificativă a DLBCL asemănătoare GCB a fost găsită la copii, ceea ce ar putea explica diferența în rezultatul clinic observat la copii comparativ cu adulții. Cu toate acestea, spre deosebire de DLBCL asemănător GCB, nu s-a găsit nicio asociere cu translocația t (14; 18), ceea ce poate sugera că alte mecanisme biologice pot sta la baza DLBCL pediatric. 18

Cele mai importante caracteristici ale tumorilor asemănătoare ABC și GCB sunt rezumate în Tabelul 1.

Tabel în dimensiune completă

Imunohistochimia permite identificarea DLCBL similar cu GCB și ABC?

Analiza microcipurilor în activitatea de diagnostic zilnică nu este încă fezabilă. Prin urmare, utilitatea imunohistochimiei în identificarea subgrupurilor DLBCL asemănătoare GCB și ABC a fost investigată de mai multe grupuri. 19, 20, 21 Majoritatea acestor studii utilizează CD10 și bcl-6 ca markeri ai celulelor B GCB și factorului de reglare MUM1/interferon (IRF) 4 ca celule B activate sau non-GCB.

CD10 este o enzimă proteolitică exprimată pe suprafața celulelor GCB și a unui număr de alte celule, inclusiv celule precursoare limfoide și unele celule epiteliale. Funcția sa exactă rămâne necunoscută, dar expresia CD10 este o constatare caracteristică a limfomului limfoblastic, Burkitt și folicular. Expresia CD10 în DLBCL se găsește în aproximativ 30 până la 40% din cazuri. 22, 23 Este, în general, considerat un marker al originii celulelor centrale foliculare și, prin urmare, este utilizat ca indicator al DLBCL de tip GCB. Mai multe rapoarte au descoperit că expresia CD10 este un factor de prognostic favorabil pentru supraviețuirea fără boală (DFS) și pentru obținerea remisiunii complete. 12, 19, 23

Se crede că gena BCL6 joacă un rol central în formarea centrului liniei germinale și este exprimată la începutul răspunsului GC și este reglată în jos după selecție pentru apoptoză sau diferențiere. Expresia proteinei Bcl-6 este strict limitată la nucleu, conservând astfel nucleul. Expresia se găsește în celulele GCB normale (atât centroblaste, cât și centrocite) și în 50-70% din celulele tumorale DLBCL. Semnificația prognostică a expresiei proteinei bcl-6 nu este încă clară. Interesant este că expresia proteinei Bcl-6 nu se corelează cu prezența sau absența rearanjării genei BCL6. 24, 25

Proteina MUM1/IRF4 (oncogena mielomului multiplu 1) este un membru al factorilor de transcripție (IRF). Acestea joacă un rol important în reglarea expresiei genelor ca răspuns la semnalizarea de către interferoni și alte citokine. MUM1/IRF4 este exprimat numai în limfocite și probabil joacă un rol crucial în dezvoltarea celulelor plasmatice. Anticorpii monoclonali MUM1 prezintă colorare nucleară în celulele plasmatice și un procent mic de celule GCB care prezintă un anumit grad de diferențiere a celulelor plasmatice. Majoritatea celulelor și mantilor GCB sunt negative pentru MUM1. Expresia MUM1 poate fi detectată în 40-50% din cazurile de DLBCL. 20, 21, 26 Spre deosebire de celulele GCB normale, în care expresia BCL6 și MUM1 se exclud reciproc, celulele tumorale DLBCL pot co-exprima ambele proteine. 27

A ) Algoritmul imunohistochimic al lui Hans și colab. pentru a împărți DLBCL în subgrupuri prognostice. b ) Un algoritm imunohistochimic alternativ pentru împărțirea DLBCL într-un grup favorabil (grupul 1) și un grup nefavorabil (grupul 2) (Muris și colab.).

Imagine la dimensiune completă

Putem distinge DLBCL similar cu ABC și GCB prin morfologie?

Deși un studiu inițial al expresiei genei DLBCL nu a arătat o corelație semnificativă statistic între moleculele de tip ABC și GCB, definite de DLBCL și variantele morfologice definite de clasificarea OMS, au fost observate unele „tendințe”. În grupul asemănător GCB, DLBCL monomorf centroblastic a fost cel mai frecvent observat, în timp ce grupul asemănător ABC a inclus majoritatea cazurilor polimorfe imunoblastice și centroblastice de DLBCL. 7 În mod similar, s-a găsit o asociere între profilul imunofenotipic CD10 + GCB și morfologia centroblastică pe de o parte și profilul imunofenotipic ABC și morfologia imunoblastică pe de altă parte. 26

Ce entități încă evoluează în cadrul DLBCL ca urmare a acestor studii?

DLBCL mare despicat

Acest limfom este format din celule limfoide mari, adesea în formă de fus, cu nuclee crestate și răsucite, lipsite de nuclee distincte și încorporate într-un sept fibros fin. Rețelele dendritice foliculare sau resturile acestora lipsesc. S-a găsit o corelație semnificativă între această morfologie, profilul imunofenotipic asemănător GCB, expresia rearanjărilor genei CD10 și BCL2. Din punct de vedere clinic, aceste cazuri prezintă o ușoară predominanță a femeilor și apar la o vârstă mai mică comparativ cu alte DLBCL. Nu s-au demonstrat diferențe în ceea ce privește DFS și supraviețuirea generală (OS) față de alte DLBCL. 28

Celula fus axial DLBCL

Aceasta este o altă entitate raportată într-un subgrup similar cu GCB. Spre deosebire de DLBCL mari clivate, aceste limfoame sunt încă CD10 și MUM1 negative, dar bcl-6 pozitive. În plus, nu prezintă dovezi ale rearanjării genelor BCL2, în timp ce mutațiile genelor BCL6 sunt demonstrate în toate cazurile. Aceste tumori apar ca limfoame extranodale primare, afectând în principal femeile. 34

DLBCL imunoblastic

Acest limfom este compus aproape exclusiv din imunoblaste. Se găsește în subgrupul de tip ABC și se caracterizează printr-o expresie consistentă a MUM1 și o expresie rară a bcl-6. Afectează cel mai adesea pacienții de sex masculin cu boală nodală avansată. În mod interesant, morfologia imunoblastică este un predictor advers semnificativ al DFS în analizele univariate și multivariate. 28

FOBCP1-pozitiv DLBCL

PMBCL

Acest limfom a fost listat ca entitate temporară în clasificarea REAL și a fost clasificat ca entitate clinicopatologică separată în clasificarea OMS. Interesant este faptul că studiile privind expresia genelor susțin acest punct de vedere, deoarece demonstrează că PMBCL au un profil de expresie distinct asociat cu limfomul clasic Hodgkin.

Informații suplimentare despre variantele DLBCL care susțin recunoașterea lor ca entități de limfom

ALK + DLBCL

Acest limfom este listat în clasificarea OMS ca o variantă morfologică rară a DLBCL. Până în prezent, în literatura de specialitate au fost raportate 15 cazuri de ALK + DLBCL. 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 Aceste cazuri se caracterizează printr-o morfologie și un fenotip puternic. Tumora constă în proliferare difuză, destul de monotonă, a celulelor mari de tip imunoblast sau plasmidic, cu fenotip celular plasmatic (CD20-/CD79a ±/CD138 +) și colorare citoplasmatică granulară subembranosă puternică pentru ALK. ALK este un membru al familiei receptorilor de tirozin kinază, iar ALK de lungime întreagă se crede că joacă un rol major în dezvoltarea nervului embrionar. Expresia ALK aberantă a fost descrisă în limfoamele cu celule mari anaplastice și în tumorile miofibroblastice inflamatorii și este rezultatul rearanjărilor genomice ale genei ALK de către diferite gene partenere. 48, 49, 50, 51 expresia ALK în DLBCL nu este rezultatul expresiei ALK complete, după cum sa raportat inițial 52, dar în majoritatea cazurilor se datorează translocației repetate a t (2; 17) (p23; q23). rezultatul este proteina de fuziune CLTC-ALK. 43, 44 În unele cazuri, expresia ALK în aceste tumori poate fi, de asemenea, rezultatul translocației t (2; 5) (p23; q35), care are ca rezultat proteina de fuziune NPM (NUCLEOPHOSMIN) -ALK. 46

Acest limfom apare la copii și adulți (cu vârsta cuprinsă între 10 și 59 de ani) și are o predominanță a bărbaților (raport bărbat-femeie 12: 3). Deși tumora este asociată cu o supraviețuire slabă la adulți, comportamentul biologic al copiilor este necunoscut din cauza numărului redus de cazuri raportate în prezent.

Limfoame bogate în celule T/histiocite (THRBCL)

Acest limfom este listat în clasificarea OMS ca variantă a DLBCL și este definit în sensul cel mai larg ca o tumoră mare cu celule B însoțită de numeroase celule T și histiocite. Acest limfom nu trebuie confundat cu limfoamele cu celule B bogate în celule T stromale, imitând limfoamele cu celule T periferice și a fost descris în trecut ca limfoame cu celule B bogate în celule T. 53 THRBCL a fost recunoscută pentru prima dată de Delabie și colab. 54 ca limfom compus dintr-un număr mic de celule B neoplazice mari dispersate (reprezentând mai puțin de 10% din populația totală de celule) încorporate într-un răspuns stromal abundent conținând celule T mici și un număr bogat de histiocite. Aceste tumori imită limfomul Hodgkin cu limfocite nodulare predominante (NLPHL). 55 Spre deosebire de NLPHL indolent, THRBCL apare mai ales într-un stadiu clinic avansat și prezintă un comportament foarte agresiv. În plus, pacienții cu THRBCL prezintă un risc ridicat de eșec al tratamentului. 56, 57

THRBCL prezintă un profil specific de expresie genică, așa cum se arată prin profilarea expresiei genice utilizând microambientul și răspunsul inflamator al gazdei ca caracteristici definitorii în DLBCL. 58 În acest studiu, au fost identificate trei clustere de DLBCL biologic robuste, caracterizate fie printr-un profil de „fosforilare oxidativă”, un „receptor/proliferare a celulelor B”, fie un „răspuns al gazdei (HR)”. Aceste clustere nu au fost legate de subgrupuri moleculare recunoscute anterior (similar cu GCB, similar cu ABC și tip III). Interesant, clusterul HR conținea THRBCL și avea o semnătură robustă a genei țintă NF-κB. Aceste descoperiri susțin în continuare noțiunea că THRBCL este o entitate distinctă de limfom.

DLBCL cu morfologie plastică plasmatică

Varianta plasmatică a DLBCL, menționată inițial ca variantă morfologică în OMS, este acum considerată un grup eterogen de tumori susceptibile să reprezinte entități diferite. Acestea sunt tumori rare care apar în mediul infecției cu virusul imunodeficienței umane (PEL și limfomul plasmablastic al cavității bucale) și la pacienții imunocompetenți (DLBCL ALK-pozitiv și limfoamele asociate cu piotoraxul 59, 60). Au fost raportate recenzii recente ale limfoamelor cu celule B diferențiate de plasmă și ale limfoamelor asociate sindromului imunodeficienței dobândite. 61, 62, 63

DLBCL care apare în locuri anatomice speciale

Spre deosebire de clasificarea limfoamelor cu celule T, localizarea anatomică nu a fost una dintre caracteristicile principale pentru definirea entităților limfomului cu celule B în clasificarea REAL și OMS. Recent, a existat un interes tot mai mare în localizarea limfoamelor cu celule B mari, deoarece comportamentul clinic poate depinde în mare măsură de locul de prezentare. Prin urmare, au fost dezvoltate sisteme de clasificare a limfomului site-specific.

În mod similar, "sistemul nervos central primar DLBCL" (PCNSL) s-a dovedit a fi asociat cu un imunofenotip predominant ABC. 66 Comportamentul clinic și prognosticul acestor limfoame nu este influențat doar de localizarea anatomică, ci aparent și de factorii biologici (tumori similare ABC față de GCB cu mecanisme oncogene subiacente diferite). Expresia imunohistochimică a bcl-6 în PCNSL sa dovedit a fi asociată cu OS mai lung. 67

concluzie

Clasificarea limfoamelor este un proces continuu condus de cunoașterea și biologia crescândă a acestor tumori, care sunt adesea dobândite folosind tehnici dezvoltate recent. Studiile microarray au ilustrat în mod clar eterogenitatea în grupul DLBCL și au identificat două subgrupuri prognostic distincte. Aceste studii au furnizat în plus o cantitate vastă de informații suplimentare despre DLBCL, ceea ce a dus la descoperirea mai multor gene care contribuie la limfomageneză, identificarea de noi căi oncogene și recunoașterea mai multor markeri prognostici noi. Hematopatologii vor trebui acum să traducă aceste date în caracteristici morfologice utile în practica de diagnostic zilnică și vor folosi aceste informații pentru a identifica alte entități clinicopatologice din cadrul grupului mare DLBCL.