• Mutația genei protrombinei 20210A la o populație sănătoasă și în condiții trombofile
  • Juraj CHUDEJ, Ivana PLAMEŇOVÁ, Pavol HOLLÝ, Eva MIKUŠKOVÁ, Daniela KOTULIČOVÁ, Juraj SOKOL, Emília FLOCHOVÁ, Ľubica VÁLEKOVÁ, Ján STAŠKO, Peter KUBISZ
  • Lek Obz, 60, 2011, nr. 4, p. 155 - 161.

REZUMAT

orizont

Context: În ultimii 20 de ani, s-au dezvăluit o serie de cauze care duc la imaginea tulburărilor hemostazice, denumită protrombotică, resp. condiții trombofile. Multe dintre ele sunt determinate genetic cu apariția tipică a trombozei idiopatice la o vârstă fragedă cu vârstă familială, altele sunt rezultatul activării hemostazei în prezența unei boli protrombotice cunoscute. Mutația protrombinei (FII 20210A) este un defect congenital care este mai frecvent la persoanele cu tromboză venoasă. Tulburarea este detectată la 2% din populația caucaziană, la 6% dintre pacienții cu prima tromboză venoasă și la până la 18% dintre pacienții din grupurile selectate cu forme recurente și familiale de boală venoasă trombotică. Riscul de tromboză este independent de vârstă și sex. FII 20210A crește riscul trombotic în special în combinație cu alți factori genetici. Poate duce la morbiditate severă și consecințele sale pot afecta semnificativ calitatea vieții individului afectat.

Materiale și metode: Am examinat 2274 pacienți pentru prezența trombofiliei congenitale la pacienții cu mutație FII 20210A, 303 indivizi sănătoși (donatori voluntari de sânge) au format un grup de control. Examinarea mutației protrombinei FII 20210A a fost efectuată prin analiza PCR (reacția în lanț a polimerazei) (amplificarea artificială a unei regiuni specifice a genei relevante) a ADN-ului cromozomial, care este izolat din leucocite obținute din sângele periferic al pacientului.

Rezultate: În grupul de 2274 de pacienți, pe care l-am examinat în mod țintit, mutația FII 20210A a fost detectată de 157 de ori (6,9%), în grupul de control a fost la 8 pacienți (2,6%). Mutația FII 20210A s-a manifestat cel mai frecvent ca tromboză venoasă la 122 (78%) pacienți.

Concluzie: Pe baza rezultatelor noastre, se poate concluziona că mutația FII 20210A este implicată semnificativ în dezvoltarea trombozei venoase în principal în populația slovacă a pacienților cu manifestări clinice de trombofilie.

Cuvinte cheie: mutația protrombinei FII 20210A - tromboză venoasă - trombofilie.

  • Prevalența genei mutației protrombinei (g-A 20210) la pacienții trombofili și la populația sănătoasă
  • Juraj CHUDEJ, Ivana PLAMEŇOVÁ, Pavol HOLLÝ, Eva MIKUŠKOVÁ, Daniela KOTULIČOVÁ, Juraj SOKOL, Emília FLOCHOVÁ, Ľubica VÁLEKOVÁ, Ján STAŠKO, Peter KUBISZ
  • Lek Obz, 60, 2011, 4, p. 155 - 161.

REZUMAT

Context: Întreaga gamă de cauze care duc la tulburări de hemostază denumite stări protrombotice sau trombofile a fost descoperită în ultimii 20 de ani. Multe dintre ele sunt condiții genetice care conduc în mod obișnuit la apariția trombozei idiopatice la vârsta fragedă, cu apariție familiară pozitivă, în timp ce altele se caracterizează prin activarea hemostazei ca urmare a unei tulburări protrombotice cunoscute. Mutația protrombinei (FII 20210A) este un defect congenital care se găsește mai frecvent la persoanele cu tromboză venoasă. Această mutație este prezentă la 2% din populația caucaziană, 6% pacienți cu primul episod de tromboză venoasă și până la 18% pacienți în grupuri selectate cu retromboză și formă familiară de boală tromboembolică venoasă. Riscul de tromboză este independent de vârstă și sex. FII G20210A crește riscul trombotic, mai ales în combinație cu alți factori genetici. Poate duce la morbiditate semnificativă, iar complicațiile sale pot avea un impact serios asupra calității vieții pacientului.

Pacienți și metode: În grupul de 2274 pacienți cu tromboză și în grupul de control 303 al donatorilor sănătoși s-a efectuat evaluarea mutației protrombinei G20210A prin analiza PCR (o multiplicare artificială a locusului genetic specific) a ADN-ului cromozomial, care a fost izolat din leucocite obținute din sângele periferic al pacientului.

Rezultate: În grupul de 2274 pacienți cu tromboză a fost semnificativă adesea mutația FII 20210A în 157 (6,9%), în grupul martor la 8 pacienți (2,6%). Mutația FII 20210A a fost clinic cel mai adesea sub forma trombozei venoase (122 pacienți, 78%).

Concluzie: Pe baza rezultatelor noastre s-ar putea concluziona că mutația FII 20210A este un factor de risc relativ frecvent care contribuie la apariția trombozei venoase în special la populația pacienților slovaci cu semne clinice de trombofilie.

Cuvinte cheie: mutația protrombinei FII 20210A - tromboză venoasă - trombofilie.

Grupul de studiu a inclus pacienți care au fost supuși screeningului trombofil în ambulatoriul NCHT (Centrul Național pentru Hemostază și Tromboză) după depășirea implicării trombotice. Deoarece majoritatea parametrilor examinați pot fi afectați de tromboză acută și terapie anticoagulantă concomitentă, este de preferat să efectuați un examen de laborator după terminarea terapiei anticoagulante. Screeningul se concentrează pe tulburările antitrombinei III, proteinei C (PC) și proteinei S (PS), rezistenței la PC activată (cu sau fără mutație a factorului Leiden), mutației protrombinei 20210A, factorului VIII, FIX, homocisteinei și sindromului antifosfolipidic și sindrom plachetar lipicios. Testele funcționale sunt utilizate mai întâi pentru diagnosticul de laborator. O determinare a antigenului este, de asemenea, necesară pentru caracterizarea ulterioară a tulburării detectate. Analiza ADN este necesară pentru a evalua mutația protrombinei 20210A. Ar trebui să avem în vedere că recunoașterea unei erori nu exclude prezența unei alte erori sau a altora. Familiile cu trombofilie marcată au mai multe șanse de a avea două sau mai multe anomalii ușoare, dar relativ frecvente, decât una gravă, dar rară.

La 157 de pacienți înrolați cu mutația FII 20210A, ne-am concentrat în istoria personală asupra apariției implicării trombotice. Ne-a interesat tipul de tromboză, anul și circumstanțele apariției sale, recurența și prezența altor riscuri congenitale, dar și dobândite de trombofilie. Datele clinice au inclus vârsta, sexul pacientului.

De la descoperirea sa în În 1996 (17), existența unei mutații în gena protrombinei 20210A a fost asociată cu niveluri crescute de FII serice ca manifestare fenotipică (17). Cu timpul, însă, au apărut lucrări care au început să pună sub semnul întrebării această relație fără echivoc (3, 4, 6, 7, 9, 24). Prin urmare, utilizarea testelor funcționale, determinarea antigenului FII, nu este o procedură fără echivoc pentru a detecta prezența acestei mutații. Putem spune că nu există o manifestare fenotipică clară a mutației protrombinei (FII 20210A). Singurul criteriu pentru diagnosticul existenței sale este rezultatul analizei ADN a genei protrombinei (expresia genotipică a variantei alelei protrombinei 20210A).

Reacția în lanț a polimerazei este utilizată pentru a identifica o anomalie genetică în gena protrombinei. Analiza genetică a alelei variantei FII a fost realizată prin amplificare PCR, care a implicat utilizarea primerilor (fragmente oligonucleotidice): 5´-TCT AGA AAC AGT TGC CTG GC-3´ și 5´-ATA GCA CTG GGA GCA TTG AAG C-3´, precum și enzima de restricție HIND III (17). Datorită acestei metode, putem distinge indivizii sănătoși de heterozigoți/homozigoti ai mutației genei protrombinei. Sângele periferic al pacientului este utilizat pentru analiza defectului ADN FII (4 ml de sânge venos colectat într-un tub special conținând 400 µl de 0,5 mol de acid etilendiaminotetraacetic EDTA).

Diferențele în apariția parametrilor individuali au fost evaluate prin testul β2 (chi pătrat) și în cazurile în care ratele de incidență au fost mai mici de 5, s-a utilizat corecția Fisher-Yats sau testul exact al lui Fisher. Considerăm diferențele în ceea ce privește nivelul de semnificație al pag

  • Anterior.
  • Următorul.