abstract

SCOPUL: Pentru a investiga dacă îmbunătățirile factorilor de risc cardiovascular, observate în condiții de echilibru energetic după schimbul de hidrocarburi (CHO) pentru grăsimile mononesaturate (MUFA), sunt observate și în condiții de restricție energetică.

PROIECTA: Studiu de intervenție clinică longitudinală utilizând două tipuri de diete cu restricție de energie (-30% din aportul inițial de energie) cu niveluri similare de grăsimi saturate și polinesaturate: o dietă bogată în CHO (55% energie CHO, 10% MUFA) și o dietă bogată în MUFA 40% energie din CHO, 25% din MUFA).

SUBIECTE: Un total de 32 de pacienți supraponderali (nouă bărbați, 23 femei, IMC: 26-45 kg/m2).

MĂSURARE: Greutatea corporală, lipidele serice, insulina plasmatică în repaus alimentar și compoziția acidului gras fosfolipidic din celule roșii din sânge au fost măsurate la momentul inițial și după 8 săptămâni. Diferiți parametri ai stării oxidative (hidroperoxizi lipidici din plasmă, capacitate antioxidantă plasmatică totală, acid uric plasmatic și vitamina E) și proliferarea serică a celulelor musculare netede (SMC) au fost, de asemenea, măsurați în aceste momente de timp.

Subiecte și metode

obiecte

Un total de 52 de pacienți cu un indice de masă corporală (IMC, kg/m2)> 25 au fost internați din secția ambulatorie a Departamentului de Boli Metabolice de la Spitalul Universitar din Montpellier după obținerea consimțământului informat. Niciunul dintre pacienți nu a avut diabet, afecțiuni renale sau hepatice sau a luat medicamente care ar putea afecta metabolismul lipidelor. Un total de 18 pacienți au fost retrași (nouă pe o dietă bogată în carbohidrați și nouă pe o dietă bogată în MUFA) deoarece, din motive personale sau profesionale, nu au putut sau nu au dorit să continue protocolul până la ultima vizită. Doi au fost excluși din studiu, deoarece aveau o boală intercurentă. Un total de 32 de pacienți (nouă bărbați și 23 de femei) au finalizat studiul de intervenție dietetică. Studiul a fost realizat în conformitate cu Declarația de la Helsinki din 1964.

Design de studiu

Analiza de laborator

Starea de oxidare a fost evaluată prin măsurarea hidroperoxizilor lipidici din plasmă, a capacității antioxidante totale a plasmei și atât a lipidelor (vitamina E), cât și a antioxidantului plasmatic solubil (acid uric). Vitamina E a fost măsurată prin HPLC utilizând faza inversă C18 și eluție izocratică cu metanol. 18 Acidul uric a fost măsurat prin metoda uricazei (Orthoclinical Diagnostic, Issy-les-Moulineaux, Franța). 19 Hidroperoxizii lipidici din plasmă au fost măsurați printr-o metodă colorimetrică care permite măsurarea selectivă a hidroperoxizilor lipidici în prezența peroxidului de hidrogen. Această procedură, numită și FOX2, măsoară oxidarea fierului feros în fierul feros prin hidroperoxizi cu cuantificarea fierului feros prin complexarea cu colorant portocaliu de xilenol și detectarea cromoforului rezultat la 560 nm. Diferența dintre probele de plasmă tratate cu trifenilfosfină pentru reducerea selectivă a hidroperoxizilor și a plasmei netratate este o măsură a hidroperoxizilor lipidici autentici, cu condiția respectării condițiilor standard.

Capacitatea antioxidantă plasmatică a fost estimată din capacitatea sa de a reduce fierul (FRAP), unde dezvoltarea unei culori albastre intense rezultată din conversia Fe (III) -2,4,6-Tri (2-piridil) s -triazină (TPTZ ) complex cu Fe (II)) -TTPZ este direct legat de cantitatea de agent reducător prezent. Valorile acidului non-uric Valorile FRAP au fost calculate prin scăderea proporției de acid uric (concentrațiile măsurate de acid uric în μmol/l × 2) din capacitatea antioxidantă totală.

Cultură de celule musculare netede

Proliferarea SMC a fost măsurată pe ser stocat la -80 ° C până la analiză. Probele de la aceiași subiecți (înainte și după studiul de intervenție) au fost testate în aceeași perioadă analitică.

Celulele musculare netede aortice au fost izolate de la șobolani Wistar masculi așa cum s-a descris mai sus. Celulele au fost incubate în DMEM/F-10 (Eurobio, Franța) suplimentat cu 10% ser fetal de vițel, 2 mmol/l L-glutamină, 25 mmol/l HEPES, 100 U/ml penicilină, 100 ug/ml streptomicină la 37 ° C ° C într-o atmosferă umidificată cu 5% CO 2/95% aer. Celulele au fost identificate ca mușchi neted prin prezența actinei musculare netede active. La confluență, celulele au fost separate cu tripsină-EDTA și subculturate. Celulele din pasajele trei până la șase au fost utilizate în acest studiu. Pentru experimente, celulele au fost însămânțate în plăci cu 24 de godeuri la 40 x 103 celule/godeu. După 24 de ore, celulele au fost incubate în mediu fără ser conținând insulină (1 μmol/l, Sigma), transferină (200 μg/ml, Sigma), ascorbat (0,2 mmol/l, Sigma) și selenit de sodiu (6,25 ng/ml). Sigma) 48 de ore pentru sincronizare în etapa G0. Celulele au fost apoi înlocuite în mediu care conține ser (5%) de la subiecții studiați. Mass-media s-a schimbat o dată. După 5 zile, celulele au fost recoltate cu tripsină-EDTA, fixate în 4% formalină și numărate pe un computer Coulter (Epics XL, Franța).

analize statistice

Rezultatul

Aderarea la dietă

Tabelul 2 prezintă aportul zilnic de alimente pentru fiecare tip de dietă. Sumele licitate descrise în acest tabel sunt una dintre cele șapte oferte care au alternat în timpul perioadei de intervenție de 8 săptămâni la un nivel de energie de 7,6 MJ/zi. A fost înregistrat un aport satisfăcător de energie, deși ușor mai mic decât cel prescris. Aportul alimentar (Tabelul 3) a arătat că procentele de energie din grăsimile totale, CHO și MUFA au fost semnificativ diferite (acizi grași saturați P 24 sau cu eliberare diferențiată de grăsimi saturate din țesutul adipos în timpul pierderii în greutate.

Tabel în dimensiune completă

Tabel în dimensiune completă

Tabel în dimensiune completă

Pierdere în greutate

Pierderea în greutate a fost de -4,4 ± 0,6 kg în săptămâna 4 și de -6,7 ± 0,7 kg în săptămâna 8 pentru o greutate corporală inițială medie de 95 ± 3 kg. Nu a existat nicio diferență semnificativă statistic între grupurile de dietă, indiferent de momentul după ajustarea greutății corporale inițiale. Pierderea FM pe unitate de pierdere în greutate a fost de 0,70, indicând faptul că pierderea în greutate a fost realizată la aproximativ 2/3 în detrimentul FM și restul 1/3 în detrimentul masei musculare, inclusiv a mușchiului și a apei. Acest raport nu a fost afectat de compoziția dietei. La sfârșitul perioadei de dietă, a existat o reducere semnificativă a circumferinței taliei (P

pentru

Modificări medii (± sem) în vitamina E normalizată în plasmă după 8 săptămâni de restricție de energie (-30% din aportul inițial de energie) cu două diete diferite: HCHO () dietă bogată în carbohidrați (n = 15); și HUF (

Imagine la dimensiune completă

Proliferarea SMC

Comparativ cu valoarea inițială, proliferarea a crescut semnificativ după dieta HCHO (+8,9 ± 4,5%, P = 0,024), dar a rămas neschimbată după dieta HUF (Figura 2). Modificările relative ale proliferării SMC (%) au fost corelate negativ cu modificările colesterolului HDL (r =, 0,37, P = 0,042). În modelul de regresie, modificările proliferării SMC au fost asociate negativ cu modificările raportului dintre acidul oleic și acidul linoleic, independent de modificările colesterolului HDL (Tabelul 7).

Modificări relative medii (± sem) în proliferarea celulelor musculare netede (SMC) (%) după 8 săptămâni de restricție de energie (-30% din aportul inițial de energie) cu două diete diferite: HCHO () dietă bogată în carbohidrați (n = 15); și HUF (

Imagine la dimensiune completă

Tabel în dimensiune completă

discuţie

Scopul acestui studiu a fost de a elucida efectul MUFA dietetice asupra pierderii în greutate, lipidelor serice, concentrațiilor plasmatice în repaus alimentar, stării antioxidante și proliferării SMC induse de ser la subiecții supraponderali pe o perioadă scurtă (8 săptămâni) de greutate activă. straturi.

Rezultatele prezente arată că reducerea aportului de energie a avut același efect asupra pierderii în greutate atunci când MUFA au fost înlocuite cu grăsimi CHO fără a modifica concentrațiile de SFA și PUFA. Absența unui efect al conținutului de macronutrienți asupra dietelor cu consum redus de energie asupra pierderii în greutate a fost, de asemenea, raportată în experimentele de scădere în greutate pe termen scurt. 26, 27, 28, 29, 30

Scăderea în greutate și compoziția grăsimilor din dietă pot afecta proliferarea SMC, un eveniment important în dezvoltarea aterosclerozei. Mata și colab. 36 au arătat că dietele îmbogățite cu MUFA au redus sinteza ADN în SMC, dar nu au măsurat proliferarea celulară. Rezultatele noastre au arătat clar pentru prima dată că răspunsul proliferării celulare induse de ser la pierderea în greutate a fost dependent de compoziția dietei: o dietă îmbogățită cu MUFA a împiedicat creșterea proliferării, așa cum sa observat în dieta HCHO. În plus, modificările proliferării SMC au fost asociate negativ cu modificările raportului dintre acidul oleic și acidul linoleic, independent de modificările colesterolului HDL. Cu toate acestea, proliferarea crescută în dieta HCHO a fost neașteptată. Îmbunătățirea metabolismului lipidelor și glucozei ar trebui să reducă susceptibilitatea la proliferare, deoarece HDL, un antagonist al LDL oxidat în ateroscleroză, nu a scăzut după dietă în acest grup. Sugerăm că modificările nivelurilor de acid oleic sau ale raportului dintre acidul oleic și acidul linoleic, așa cum s-a observat cu fosfolipidele din membrană eritrocitară, au fost susceptibile să apară în lipoproteinele plasmatice și ar putea avea un efect de reglare puternic asupra proliferării SMC.

În concluzie, am arătat că în timpul acestei încercări de scădere în greutate de 8 săptămâni, o reducere cu 30% a aportului de energie prin MUFA sau CHO a avut același efect asupra pierderii în greutate, colesterolului seric și insulinei de post. Cu toate acestea, chiar și în aceste condiții de restricție energetică, o dietă bogată în MUFA a avut efecte mai bune asupra concentrațiilor serice de TG decât o dietă bogată în CHO, sugerând că dietele bogate în MUFA pot avea beneficii cardiovasculare pe termen lung. În plus, modificările concentrației plasmatice de vitamina E și proliferarea SMC indusă de ser au fost în concordanță cu efectul protector al acidului oleic asupra stării oxidative și a proliferării SMC, adică asupra riscului cardiovascular. Astfel, combinația dintre pierderea în greutate și reducerea grăsimilor saturate la un procent real de 10%, așa cum sa realizat în acest studiu, lasă posibilitatea de a modula distribuția între CHO și MUFA în funcție de preferințele pacientului, profilul metabolic și obiectivul nutrițional, dar MUFA admisie.