S-a născut la 2 decembrie 1923 în New York, SUA.
Copilăria ei nu a fost fericită. Ea a suferit de complexe de mare supraponderalitate și conflicte constante între părinți, care au culminat în cele din urmă cu separarea lor. Când avea 13 ani, mama ei s-a întors cu ea la Atena. Convinsă că fiica are un mare talent de cântat și o poate dezvolta doar în Grecia.
Deși Maria nu credea deloc așa, nu a putut rezista presiunii mamei sale, care s-a ocupat și de ambițiile sale artistice neîndeplinite. A mers la examenele de conservator - și spre marea ei surpriză, a reușit imediat. Abia atunci s-a trezit în ea dorința reală de a cânta și, treptat, a crescut și încrederea în sine, care a fost îngreunată de mediul familial nefavorabil.
A debutat ca cântăreață de operă în 1939 cu rolul lui Santuzza în Sedliak gavalier al lui Mascagni. Experții au apreciat-o pe soprana dramatică extrem de colorată a cântăreței, marea ei capacitate de a empatiza cu personajul, de a-i oferi actoria necesară și, în același timp, de a stabili o relație emoțională puternică cu publicul. Cu toate acestea, Maria Callas nu a reușit să demonstreze pe deplin și să dezvolte în continuare aceste calități decât după al doilea război mondial.
A fost convinsă de ele în 1947, când a cântat personajul principal în opera La Gioconda a lui Ponchielli din Verona, Italia. Criticii au spus că are „atingere și unicitate supremă” și, de atunci, a crescut de neîntrerupt din ce în ce mai sus și din moment ce a slăbit aproape 30 de kilograme în același timp, frumusețea ei dramatică specifică ar putea ieși în evidență pe scenă.
Maria Callas a cântat pe toate scenele cunoscute ale operei mondiale. Repertoriul s-a axat pe operele bel cantoului italian (Puritanii lui Bellini, Traviata lui Verdi, Balul mascaradei, Macbeth, Aida, Troubadour, Tosca lui Puccini, Lucia din Lammermoor a lui Donizetti, Anna Bolen, Alcesta lui Gluck, Ifigenia pe Tauride, Medea lui Cherubini). Rolul ei cel mai cunoscut și cel mai popular a fost Norma în opera cu același nume a lui Bellini, despre care a spus că compozitorul pare să scrie pentru ea.
Maria Callas nu a atras atenția doar cu talentul ei excepțional. Personalitatea ei dezechilibrată, marcată de o copilărie dificilă și, în același timp, de un sentiment de responsabilitate față de public, a fost cauza multor scandaluri teatrale, care au avut întotdeauna un mare răspuns în mass-media. Cel mai mare a avut loc în ziua de Anul Nou 1958 la Roma, când după primul act al Norma, ea a refuzat să continue din cauza presupusei indispoziții, deși președintele italian Giovanni Gronchi a stat și el într-un public plin de personalități importante.
La acea vreme, ea a stabilit și o relație cu multimilionarul grec Aristotel Onassis, despre care a vorbit ca „cea mai mare iubire din viața ei”. A divorțat și pentru el (1959), dar, deși a trăit cu el mai bine de zece ani, s-a căsătorit în cele din urmă cu Jackie Kennedy (1968). Maria Callas a aflat doar cu trei zile înainte de nunta lor.
A cântat ultima dată la Operă în 1965 (Tosca în Covent Garden, Londra). În 1969, a creat personajul principal în filmul lui Pasolini Médea, unde a dovedit că are și abilități de actorie. Din 1971, a lucrat ca profesor la Academia Julliard din New York. În 1973-74, a făcut turnee în Japonia și Coreea împreună cu partenerul ei preferat, Giuseppe di Stefan. Ea a stat ultima dată în fața unei audiențe la Tokyo, pe 10 noiembrie 1974.
După aceea, Maria Callas a fost retrogradată din ce în ce mai mult în izolarea apartamentului ei din Paris, unde a murit și ea de un atac de cord la 16 septembrie 1977.
Cenușa sa a fost împrăștiată pe malul Greciei, în apele Mării Egee.