Screeningul și posibila specificare a anticorpilor anti-eritrocite fac parte din orice test pre-transfuzional. Pacienții cu boli inflamatorii și autoimune prezintă un risc de 3 ori mai mare de aloimunizare. Identificarea aloanticorpilor în bolile reumatologice este adesea complicată de găsirea autoanticorpilor care aparțin imaginii lor relativ comune de laborator.
Etiologie
Anticorpii anti-eritrocite sunt imunoglobuline din clasa IgG și IgM, rareori IgA, care sunt direcționate împotriva oricărui antigen eritrocitar. În prezent, sunt cunoscuți mai mult de 340. Anticorpii sunt împărțiți în natură regulată și imună. Obișnuitele naturale apar fără imunizare, sunt clase IgM, aceasta include anticorpi în sistemul AB0. Anticorpii care se formează numai după imunizare (prin transfuzie sau transplant, în timpul sarcinii) sunt denumiți imuni neregulați. Există clase de IgG, deși IgM se formează inițial în faza incipientă a răspunsului imun. Funcția unui anticorp este de a elimina „străinul” din propriul organism. În cazul distrugerii eritrocitelor transfuzate cu anticorp legat, se aplică activarea complementului care determină fie hemoliza intravasculară, fie extravasculară, sau se aplică fagocitoza eritrocitelor de către celulele sistemului monocito-macrofag urmată de hemoliza extravasculară.
Nu toți anticorpii antieritrocitari sunt relevanți clinic. Doar cele care cauzează distrugerea semnificativă a eritrocitelor transfuzate care poartă antigenul corespunzător sunt considerate semnificative clinic (Tabelul 1). Acestea includ - pe lângă anti-A, anti-B, anti-A, B - acei anticorpi care reacționează într-un test de antiglobulină indirect la 37 ° C (NAT), prin urmare NAT este utilizat în screening-ul și identificarea lor (1).
Diagnostic
Anticorpi naturali anti-A, anti-B și anti-A, B. sunt determinate ca parte a testului grupului sanguin AB0 utilizând eritrocitele de diagnostic A1 și B. Pentru interpretarea corectă a grupului AB0 rezultat, antigenele eritrocitelor A și B sunt testate simultan cu diagnosticul monoclonal anti-A și anti-B (Tabelul 2).
Pe detectarea anticorpilor neregulați în serul/plasma pacientului în prezent se folosește un test indirect de depistare a antiglobulinei (Figura 1) folosind cel puțin 3 eritrocite diagnostice cu un fenotip definit. Se utilizează metoda de aglutinare a coloanei (Figura nr. 2) sau faza solidă (Figura nr. 3) - manual sau pe analizori automati de celule sanguine. Eritrocitele diagnostice trebuie să aibă antigene reprezentate în fenotip: C, C w, c, D, E, e, K, k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, S, s, M, N, Le a; în reprezentare homozigotă Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, S, s; cel puțin un screening pentru eritrocite are fenotipul R1R1 (DCe/DCe) sau R1 w R1 și un fenotip R2R2 (DcE/DcE) (Brguig). Astăzi, acest test este o parte integrantă a examinării grupelor sanguine AB0 și RhD și a oricărui examen pre-transfuzional (1, 7, 9).
Imaginea nr. 2: screening anticorp NAT - aglutinare pe coloană (3). Microtubul conține o matrice de gel cu ser Coombs. O suspensie a eritrocitelor diagnostice într-o soluție LISS modificată (soluție cu rezistență ionică scăzută) la o anumită concentrație este adăugată la microtub, urmată de serul/plasma pacientului. După 15 min. incubația la 37 ° C și centrifugarea ulterioară, rezultatul reacției este citit. Dacă serul/plasma conține anticorpul, eritrocitele, după legare, nu ar putea coborî prin matricea de gel până la fundul microtubului în timpul centrifugării și să rămână în partea de sus. În absența anticorpului, eritrocitele diagnostice sunt depuse la baza microtubului. Puterea reacției este scăzută la +. Rezultatul este -, - /+, +, ++, +++, ++++.
În cazul hemoterapiei planificate, se adaugă screeningul anticorpilor test de compatibilitate, care se efectuează prin aceeași metodă ca screeningul anticorpilor și eritrocitele de transfuzie și serul/plasma pacientului sunt utilizate în reacție.
Dacă rezultatul screeningului este pozitiv, specificarea anticorpilor cu un panou de cel puțin 8 eritrocite diagnostice cu un fenotip cunoscut. Cel puțin un eritrocit diagnostic are fenotipul R1R1, R1 w R1, R2R2, r´r (Cde/cde) ar´r (cde/cdE), cel puțin două au antigenul K, k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, S, s; cel puțin unul este de fenotipul k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, M, S, s în reprezentare homozigotă; cel puțin trei au fenotipul rr (cde/cde) și în același timp un antigen K și unul dintre ei are o reprezentare homozigotă a k, Fy a, Fy b, Jk a, Jk b, M, S, s. Acest panou este utilizat pentru a evalua reactivitatea ser/plasmă a pacientului în NAT și, de obicei, într-un test enzimatic (7). Enzime (bromelaină, papaină) poate modifica proteinele care poartă niște antigeni eritrocitari, astfel încât reactivitatea lor cu anticorpul este fie îmbunătățită, fie eliminată. În plus față de aceste proceduri de bază, altele sunt utilizate pentru a specifica un amestec de anticorpi anti-eritrocite tehnici speciale (Tabelul 4) (5, 8). În practica obișnuită, aloanticorpii cei mai frecvent testați sunt anti-M, anti-E, anti-c, anti-D, anti-C, anti-Le.
Reacții hemolitice posttransfuzionale
Dacă anticorpul nu este capturat în examinarea pre-transfuzională (datorită unei erori de examinare, datorită reactivității foarte slabe sau datorită atenuării anticorpului sub metodele de detectare din metodologia disponibilă), există riscul unei post-transfuzii reacție hemolitică atunci când se administrează sânge incompatibil. Reacția hemolitică acută post-transfuzie are un curs dramatic și este de obicei cauzată de administrarea de sânge incompatibil AB0 din cauza unei erori administrative și a nerespectării procedurii obligatorii pentru administrarea terapiei transfuzionale. Pe de altă parte, reacția hemolitică întârziată post-transfuzie este adesea cauzată de anticorpi care nu au putut fi capturați în momentul examinării pre-transfuzionale și un efect de rapel, un răspuns imun al memoriei, apare în câteva zile după administrarea unui sânge. Rezultă în generarea unui aloanticorp care determină o scurtare semnificativă a supraviețuirii eritrocitelor transfuzate, însoțită de simptomele clinice enumerate în tabelul nr. 5 (2, 4).
În cazul apariției semnelor unei reacții post-transfuzionale la un pacient, pe lângă întreruperea imediată a hemoterapiei, examenului clinic și procedurilor medicale de bază, trebuie efectuate teste de laborator cât mai curând posibil. Pentru a examina reacția post-transfuzională, sângele pacientului este necesar pentru a verifica rezultatele grupului sanguin ABO și RhD, screeningul anticorpilor și un test de compatibilitate. Se adaugă un test antiglobulină direct (PAT) pentru a confirma legarea anticorpului de eritrocitele transfuzate. Serul Coombs (de obicei anti-IgG + C3d) este adăugat la eritrocitele probei pacientului. Dacă anticorpul este legat de eritrocitele transfuzate, serul Coombs va provoca aglutinare. Dacă PAT este pozitiv, este pregătit un eluat. Metodele fizico-chimice specifice (în prezent cel mai frecvent utilizat test de eluție acidă) eliberează anticorpul din eritrocite în eluat, care este apoi utilizat pentru a identifica aloanticorpul similar cu serul/plasma pacientului. În același timp, se repetă toate testele din proba originală trimisă la banca de sânge și din pungile de transfuzie cu produse din sânge. Dacă PAT a fost, de asemenea, pozitiv în eșantion înainte de transfuzie, ar trebui investigată o altă cauză posibilă (medicamente, proces autoimun etc.).
Dacă se suspectează o reacție hemolitică post-transfuzională, se va efectua hemograma pacientului, inclusiv numărul de reticulocite, hemocoagularea inițială pentru a exclude hemocoagularea intravasculară diseminată și testele biochimice de sânge și urină pentru a confirma procesul hemolitic și semnele de insuficiență renală (1) . Raportarea reacțiilor adverse post-transfuzie se efectuează în conformitate cu legislația slovacă aplicabilă (10).
Problema aloimunizării depășește scopul acestei lucrări. Cu toate acestea, trebuie subliniat faptul că, în cazurile indicate - adică la pacienții cu perspectivă de tratament cu poltransfuzie, într-un program de transplant, la pacienții cu aloanticorpi cunoscuți și cu anemie hemolitică autoimună - examinarea fenotipului eritrocitar complet al pacientului și administrarea minimă de ABO Produse de transfuzie a eritrocitelor compatibile Rh și K.
Concluzie
Examinarea imunohematologică adecvată pre-transfuzie efectuată printr-o metodă adecvată și sensibilă este crucială în prevenirea reacțiilor hemolitice post-transfuzionale. La pacienții cu poltransfuzie, riscul de aloimunizare este crescut și, prin urmare, în legătură cu unele diagnostice, problema examinării fenotipului eritrocitar complet înainte de inițierea hemoterapiei este deosebit de relevantă.