Administrarea vitaminei C și efectul acesteia asupra anumitor caracteristici ale eritrocitelor umane

Autori: Juraj Krajčír1, Katarína Kučerová1, Jana Laceková1, RNDr. Terézia Kalnovičová, CSc.2, MUDr. RNDr. Angelika Púzserová, PhD.3, RNDr. Ľubomíra Tóthová, PhD.4, MUDr. Mgr. Rudolf Drábek5, MD Dr. Jana Radošinská. 5,6

1 Facultatea de Medicină, Universitatea Comenius din Bratislava
2 I. Departamentul de Neurologie, Facultatea de Medicină, Universitatea Comenius și Națiunile Unite din Bratislava
3 Institutul de fiziologie normală și patologică al Academiei Slovace de Științe din Bratislava
4 Institutul de Biomedicină Moleculară, Facultatea de Medicină, Universitatea Comenius din Bratislava
5 Institutul de Fiziologie, Facultatea de Medicină, Universitatea Comenius din Bratislava
6 Institutul de Cercetare a Inimii SAS din Bratislava

Introducere

Capacitatea eritrocitelor (celulele roșii din sânge) de a-și schimba forma - deformabilitatea - este importantă pentru calitatea microcirculației și aprovizionarea suficientă cu oxigen a țesuturilor, deoarece eritrocitele cu diametrul de 7,2 μm trebuie să treacă prin capilare cu un diametru interior de aproximativ 3-4 μm. Această proprietate afectează în mod semnificativ viabilitatea globulelor roșii, fluxul sanguin și hemodinamica ca atare. Se acceptă în general că vâscozitatea sângelui integral depinde și de deformabilitatea eritrocitelor. Scăderea deformabilității eritrocitelor poate duce la probleme cu alimentarea cu sânge a țesuturilor, oxigenarea acestora și, prin urmare, deteriorarea organelor (1).

Producția de oxid nitric (NO) este un factor important care influențează deformabilitatea eritrocitelor. Acest vasodilatator important, care dilată vasele de sânge, este alcătuit nu numai din celulele vasculare, ci și din celulele roșii din sânge. Inhibarea producției de NO duce la deteriorarea deformabilității eritrocitelor, care este normalizată de donatorii de NO (2).

Vitamina C este o substanță esențială, solubilă în apă, care este implicată în hidroxilarea organismului de prolină și lizină în colagen, sinteza carnitinei, metabolismul tirozinei, dar mai ales este un antioxidant foarte important. Există lucrări cunoscute care au studiat efectul vitaminei C asupra deformabilității eritrocitelor la modelele animale, respectiv. în condiții in vitro (cu excepția corpului viu) (3, 4). Efectul său asupra deformabilității eritrocitelor și a hemorologiei sângelui la om (condiții in vivo) este necunoscut. Datorită acestui fapt, ne-am concentrat în experimentul nostru asupra efectului administrării de 3 săptămâni a vitaminei C asupra deformabilității eritrocitelor și producției de eritrocite NO, monitorizând în același timp parametrii selectați ai stării antioxidante și stresului oxidativ la tinerii sănătoși.

Material si metode

Participanții la studiu de ambele sexe aveau vârsta cuprinsă între 20 și 33 de ani (n = 20), care aveau sânge venos extras în tuburi care conțin anticoagulant EDTA (Sarstedt) la începutul experimentului și după 3 săptămâni de administrare de vitamina C în formă de L 1000 mg/zi, NATURAL, sro, Republica Slovacă). Sângele integral a fost utilizat pentru a determina producția de NO în eritrocite. După centrifugarea sângelui rămas (850 g, 10 min, 4 ° C), plasma a fost colectată pentru analiza biochimică a parametrilor selectați ai stării antioxidante și a stresului oxidativ. Peleta de eritrocite a fost spălată de 3 ori cu soluție salină pentru a obține o fracțiune de eritrocite pure, care au fost utilizate pentru a măsura deformabilitatea lor.

Gradul de deteriorare oxidativă a fost determinat prin măsurarea markerilor de deteriorare oxidativă (TBARS, AGE, fructosamină, AOPP). Acești markeri sunt crescuți de stresul oxidativ, stresul oxidativ fiind o afecțiune în care echilibrul din sistemul prooxidant-antioxidant este perturbat, înclinând echilibrul în favoarea prooxidanților (predominanța relativă a radicalilor liberi asupra capacității antioxidante). Se știe că stresul oxidativ poate duce la deteriorarea structurilor biologice, cu afectarea lipidelor, proteinelor, carbohidraților și acizilor nucleici (inclusiv ADN). Markerii de peroxidare a lipidelor (substanțe reactive ale acidului tiobarbituric - TBARS) au fost măsurați spectrofotometric. Produsele finale avansate de glicație (AGE) și fructozamina au fost determinate din markeri de stres carbonilic. Produsele proteice de oxidare avansate (AOPP) au fost măsurate ca un marker al deteriorării proteinelor oxidative. Pentru informații despre starea antioxidanților, s-au determinat capacitatea antioxidantă totală (TAC) și puterea antioxidantă reducătoare a ferrei plasmatice (FRAP). Toate măsurătorile au fost efectuate după cum s-a publicat anterior (5).

Deformabilitatea eritrocitelor a fost determinată prin metoda filtrării și este prezentată ca raportul numărului de eritrocite care au trecut printr-un filtru cu o dimensiune a porilor de 5 µm din numărul total de eritrocite înainte de filtrare (6). Producția de NO în eritrocite a fost vizualizată folosind o sondă de fluorescență DAF-2 DA (diaminofluoresceină diacetat) și cuantificarea semnalului de fluorescență a fost evaluată în ImageJ (6).

Toate rezultatele sunt prezentate ca medie ± deviație standard. Am testat normalitatea datelor cu testul Shapiro-Wilk. Diferențele de date înainte și după administrarea vitaminei C au fost analizate prin test t asociat. Am considerat că cele cu o valoare p mai mică de 0,05 sunt semnificative statistic.

Studiul a fost evaluat și aprobat de Comitetul de Etică al Facultății de Medicină a Universității Charles și Spitalul Universitar Bratislava pe 15 februarie 2016.

Rezultatele

Deformabilitatea eritrocitelor a fost statistic semnificativ crescută după 3 săptămâni de administrare a vitaminei C (Graficul 1). La măsurarea producției de NO în eritrocite, a fost observată și o creștere a vitaminei C după administrarea vitaminei C (Graficul nr. 2). Dintre cei șase markeri ai stării antioxidante și a stresului oxidativ, am observat modificări semnificative doar cu fructozamină, a cărei concentrație plasmatică a crescut după administrarea vitaminei C.

vitaminei

Graficul 1: Deformabilitatea eritrocitelor. Semnificație statistică: * p Urmați-ne
pe social
rețeaua facebook