ieri

Saliva ca mediu suplimentar de examinare este cunoscută de endocrinologi de peste 40 de ani. Examinarea salivei evită colectarea sângelui dintr-o venă și stresul asociat, durerea la locul puncției venoase, o vizită la pacient la locul de muncă clinic sau viceversa personalul clinic din mediul de acasă al pacientului.

Colectarea salivei este ușor acceptată de pacienți, neinvazivă și necesită o pregătire minimă. Astfel, permite colectarea de probe multiple pentru a investiga orice variații biologice intra-individuale. În ciuda beneficiilor și avantajelor analitice promițătoare în ceea ce privește costul și colaborarea pacientului, testele de salivă nu au intrat în practica clinică. Singura excepție este cortizolul în diagnosticul sindromului Cushing.

Colectare și analiză

Există două metode de bază de colectare a salivei - saliva pasivă și colectarea absorbantă (de obicei un tampon de bumbac sau tampon sintetic). Metodologiile sunt comparate în Tabelul nr. 2. În practica clinică și în majoritatea studiilor, saliva este colectată cu ajutorul absorbanților, din care se obține ulterior prin centrifugare. În prezent sunt disponibile mai multe tuburi comerciale de colectare de la mai mulți producători. Toate sistemele folosesc tampoane, care sunt introduse pentru un timp precis definit (de obicei 1-2 minute) fie sub limbă, fie în interiorul obrazului, unde se înmoaie în salivă și apoi îl introduc în recipientul de colectare.

Datorită stabilității lor în salivă, steroizii sunt destinați direct determinării în salivă. Chiar și atunci când sunt depozitate la temperatura camerei, glucocorticoizii și androgenii în saliva „netratată” sunt stabile timp de câteva zile, permițând trimiterea probelor la laborator prin poștă. Peptidele sunt mai solicitante pentru tratamentul preanalitic adecvat al probelor - se adsorb pe pereții tuburilor într-o măsură mai mare și, în plus, saliva conține enzime proteolitice care determină degradarea rapidă a hormonilor peptidici. Pierderile datorate adsorbției și degradării pot fi prevenite prin utilizarea unor tuburi speciale (așa-numitele criotuburi cu conținut scăzut de proteine) și prin adăugarea de conservanți (de exemplu EDTA). Se recomandă măsurarea transferinei salivei pentru a exclude posibila contaminare a sângelui. Este important ca laboratoarele care examinează probe de salivă să valideze matricea de salivă. Înlocuirea simplă a salivei cu teste care sunt destinate în principal pentru măsurarea steroizilor din sânge duce de obicei la inexactități.

Indicații și perspective pentru utilizarea clinică a testării hormonilor în salivă

Indicațiile pentru examinarea hormonilor din salivă sunt date în Tabelul nr. 3.

Screening pentru hipercortizolism (sindromul Cushing)

Monitorizarea modificărilor hormonale fiziologice și patologice în medicina sportivă

Urina și sângele sunt în prezent singurele fluide corporale acceptate pentru testarea antidoping - așa cum a raportat Agenția Mondială Antidoping. Probele de salivă pot aborda unele dintre specificitățile testării antidoping - sunt simple, neinvazive, neutre din punct de vedere sexual și direct controlabile. Nu în ultimul rând, au posibilități limitate de adulterare, care este o problemă majoră la testarea probelor de urină. Prin urmare, este doar o chestiune de timp înainte ca examinarea steroizilor (sau a altor substanțe hormonale interzise) administrate exogen în salivă să extindă posibilitățile de monitorizare antidoping a sportivilor. Este de remarcat faptul că saliva este deja utilizată în mod obișnuit pentru a monitoriza consumul de droguri la locul de muncă, în toxicologie clinică, drept penal și în programele de conducere a drogurilor.

Monitorizarea steroizilor la pacienții cu cancer adrenocortical și tratați cu mitotan

Mitotanul este medicamentul de primă alegere în terapia adjuvantă la pacienții cu cancer adrenocortical - fie după rezecție completă, recurență sau în cazuri de ACC inoperabil și/sau metastatic. Efectul său (efect citotoxic direct asupra celulelor adrenocorticale și blocarea steroidogenezei prin inhibarea 20,22-desmolazei și 11β-hidroxilazei) induce insuficiența adrenocorticală, care necesită terapie de înlocuire cu hidrocortizon. Nici cortizolul seric nu poate fi utilizat pentru a monitoriza tratamentul de substituție, deoarece mitotanul crește nivelurile de globulină care leagă cortizolul (CBG) (nivelurile de cortizol seric sunt, prin urmare, crescute) sau cortizolul urinar liber. Mitotanul crește, de asemenea, clearance-ul steroizilor, astfel încât nivelurile de cortizol urinar liber sunt crescute, iar pacienții necesită doze de 2-3 ori mai mari de hidrocortizon pentru a realiza o substituție adecvată.

Determinarea nivelurilor de ACTH poate fi utilizată ca indicator indirect, dar trebuie avut în vedere faptul că nivelurile sunt pulsate și suprimate mult timp la pacienții cu ACC cu hipercortizolism persistent. Cortizolul salivar nu este afectat de modificările CBG și, corelat cu nivelurile de cortizol fără ser, reflectă mai precis terapia de substituție a hidrocortizonului la pacienții tratați cu mitotan. Ar trebui subliniat aici că metodologia aleasă este cromatografia lichidă de înaltă presiune (HPLC) cu spectrometrie de masă tandem (LC-MS/MS). Acest lucru se datorează faptului că inhibarea steroidogenezei indusă de mitotan duce la acumularea de intermediari și steroizi similari din punct de vedere structural care provoacă reactivitate încrucișată (cu steroizi endogeni precum 6β-hidroxicortizol, 21-deoxicortizol, corticosteron și derivați cortizol conjugați cu cortizol) .Metodologie ECLIA ( imunoanaliză electrochiluminiscentă).

Determinarea hormonilor peptidici

Nu există standarde de referință în salivă pentru majoritatea hormonilor peptidici. Acest fapt este, în general, utilizat în determinarea cantitativă a hormonilor peptidici, atunci când aceștia servesc drept markeri promițători ai bolilor orale specifice și sunt susceptibile de a deveni utile în capul și gâtul și tumorile orale.

Concluzie

Beneficiul clinic al determinării hormonilor în salivă este incontestabil și subestimat. Obstacolul principal și cel mai frecvent menționat este absența cercetării, standardizării și standardelor de referință, dar toate aceste probleme sunt obstacole în determinarea hormonilor prin metode „comune” în fluidele corporale „standard”. Sper că determinarea hormonilor din salivă va deveni o parte comună a practicii endocrinologice clinice de rutină.

Literatură: