abstract
Osteomielita multifocală cronică recurentă (CRMO) se caracterizează prin leziuni inflamatorii recurente în metafiza oaselor lungi și afectează de obicei copiii și adolescenții. Similitudinea cu tulburarea autosomală recesivă a șoarecilor (CMO, osteomielită cronică multifocală) ne-a determinat să efectuăm un studiu de asociere bazat pe familie cu doi markeri pe cromozomul 18q din regiunea omologă localizării șoarecilor CMO. Am găsit o asociere semnificativă a CRMO cu alela rară a markerului D18S60, ducând la un risc relativ de haplotip (HRR) de 18. Aceasta sugerează existența unei gene în această regiune care contribuie semnificativ la etiologia CRMO și demonstrează că primele dovezi ale bazei genetice CRMO. Această genă este diferită de RANK, care este mutată în osteoliza de expansiune familială (FEO), dar nu în CRMO. Screeningul mutațional în RANK și genele PIGN și KIAA1468 a condus la detectarea a două variante (una în RANK și una în PIGN) care se află în dezechilibru de legare cu alela D18S60 rară, dar nu sunt asociate independent cu CRMO.
Material si metode
pacienți
Douăzeci și șapte de pacienți cu CRMO și părinții lor au fost luați din mai multe centre din Germania. Toți pacienții erau de origine germană, cu excepția unui pacient turc și unul croat. Diagnosticul CRMO s-a bazat pe leziuni osteolitice cu scleroză marginală în radiografie, stare generală bună și hemoleucogramă normală. În plus, a existat un sit multifocal și/sau caracteristic (metafiza oaselor lungi sau a claviculei) și/sau pustuloză palmoplantară concomitentă. Consimțământul informat scris a fost obținut de la toți pacienții și/sau părinții lor. Protocolul de studiu a fost aprobat de Comitetul de Etică al Departamentului Medical al Universității din München.
Studii moleculare
analize statistice
Datele genotip pentru markerii D18S1148 și D18S60 au fost analizate statistic prin două metode de asociere bazate pe familie, riscul relativ haplotip (HRR) 11 cu testul exact Fisher și testul dezechilibrului dezechilibru (TDT) 12 cu valorile P determinate utilizând o distribuție binomială cu o test binomial. Valorile P au fost comparate cu nivelul de semnificație corectat pentru testarea multiplă folosind corecția Bonferroni pentru doi markeri, fiecare cu cinci alele, utilizând un factor de corecție de 5-1 = 4 pentru numărul de alele, așa cum sugerează Schaid, 13 înmulțit cu numărul de markeri (2x4 = 8) (a = 0,05: 8 = 0,00625, a = 0,01: 8 = 0,00125). Pentru fiecare marker, am testat încă patru alele comune și am combinat alele foarte rare (n ⩽ 3) în a cincea alelă netestată. Pentru o analiză suplimentară a datelor haplotipului (varianta PIGN Exon 15, 1692A/T și varianta RANK Exon 9, 971G/A), a fost utilizat testul exact Fisher pentru analiza asocierii între marker și variantă și TDT, așa cum a fost implementat în GENEHUNTER 14 pentru analiza asocierii între CRMO. și haplotipuri.
Rezultatul
Pentru markerul D18S1148, nu s-a observat nicio diferență între frecvențele alelelor dintre alelele parentale transmise (alele transmise pacienților) și alelele parentale netraduse (pseudocontrole). Într-unul dintre cele 27 de pseudocontrole (54 alele parentale netransmisibile), o alelă rară (166 pb în lungime) a markerului D18S60 a fost descrisă în starea heterozigotă, descrisă la 0,05 în pedigree CEPH, într-unul din cele 27 de pseudocontrole (54 alele parentale netransmisibile) 11 din 27 de pacienți pacienți și niciunul dintre părinți nu a fost homozigot pentru această alelă). Această diferență este foarte semnificativă (P = 0,0011 A, prezentă în 6 din 54 transmise și 2 din 54 alele parentale netraduse, nu are nicio asociere semnificativă cu CRMO (P = 0,26). Cu toate acestea, este semnificativ asociată cu alela D18S60/166. bp (RANK/A a fost prezent în 5 din 12 cromozomi parentali cu alela D18S60/166 bp și 4 din 96 fără, P = 0 0007).
Haplotipuri D18S60-PIGN-RANK pe cromozomii transmiși și netraduși ai părinților pacienților cu CRMO. Lungimea alelei D18S60 în bp este prezentată cu alelele concomitente PIGN1692 (A sau T) și RANK971 (G sau A), unul câte unul haplotipurile sunt observate doar o dată sau de două ori rezumate în „altele”.
Imagine la dimensiune completă
discuţie
Mulțumiri
Mulțumim pacienților și familiilor lor pentru participare, G Shen-Ong pentru discuția utilă și medicilor pentru ajutorul acordat în recrutarea pacienților: M Borte, Leipzig, H Girschick, Würzburg, R Häfner, Garmisch-Partenkirchen, T Hospach, Stuttgart, V Jansson, München, J și S Killburger, Schalksmühle, RM Küster, Bad Bramstedt, M Mann, St. Augustin, J Meister, Aue, D Meyer, Ulm, W Oelkers și B Riedel, Hamburg, KH Pulcher, Hargesheim, M Sailer, Innsbruck, C Schauer-Petrowskaja, Berlin-Buch, F Schilling, Mainz, P von Schönaich, Augsburg, P Schütze, Dresda.