posibilități

În medie, a existat o creștere a infecțiilor cauzate de chlamydia și micoplasma. Incidența crescută a bolii este confirmată și de statisticile noastre de laborator.

Acestea sunt bacterii care trăiesc în interiorul celulelor umane, știm mai multe dintre ele, dar două grupuri sunt deosebit de importante:

  • unele provoacă infecții ale sistemului urogenital și reproductiv,
  • acestea din urmă afectează în principal căile respiratorii superioare și inferioare.

Infecțiile cauzate de Chlamydia trachomatis sunt considerate a fi cele mai frecvente dintre toate bolile cu transmitere sexuală. Diagnosticul și tratamentul infecției cu clamidie sunt mai dificile, deoarece în majoritatea cazurilor este ascuns, fără simptome vizibile majore. Micoplasmele și ureaplasmele sunt cei mai frecvenți colonizatori ai tractului urogenital uman după chlamydia. Acești agenți patogeni au fost asociați cu uretrita acută la bărbați și vaginită și cervicită la femei. Mycoplasma hominis și Ureaplasma urealyticum sunt adesea diagnosticate la femeile fără simptome ale bolii. Atât Mycoplasma pneumoniae, cât și Chlamydia pneumoniae sunt agenți cauzali în infecțiile tractului respirator superior și inferior, adesea cu un curs asimptomatic sau ușor de.

Diagnosticul precoce de laborator al acestor agenți patogeni, tratamentul și controlul infecțiilor, inclusiv măsuri preventive, necesită cercetare și investigare continuă a contextelor clinice și epidemiologice.

Metode de diagnostic

Metode de diagnosticare directă se bazează pe dovezi ale microorganismului în cauză într-un eșantion prelevat direct din locul suspectat de infecție. Deoarece acestea sunt microorganisme cu condiții de cultură solicitante, cultivarea nu este utilizată în condiții normale de laborator. Prin urmare, metodele de detectare directă se bazează pe detectarea antigenului sau ADN-ului. Factorul decisiv în metodele de evidență directă este calitatea eșantionului prelevat. Acest lucru este deosebit de important în chlamydia, deoarece acestea sunt microorganisme intracelulare și, prin urmare, este important ca proba să conțină celule epiteliale. Probele care conțin doar secreții și exudate pot să nu fie suficiente pentru un diagnostic adecvat. Aceste metode pot detecta, de asemenea, microorganisme moarte care pot fi prezente într-o probă după terminarea terapiei până când sunt eliminate de sistemul imunitar. Prin urmare, se recomandă urmărirea post-tratament la o distanță de cel puțin 3 săptămâni.

Diagnosticare indirectă se bazează pe detectarea anticorpilor din ser prin diferite metode imunologice.

Chlamydia trachomatis

Diagnosticare directă:

  • dovezi ale lui Ch. trachomatis - prin metoda imunocromatografică (la cerere Microbiologie clinică I),
  • Dovada ADN Ch. trachomatis - Metoda PCR (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

Diagnosticul direct este utilizat în principal pentru a prezice stadiul acut al infecției atunci când descoperirea ADN este Ch. trachomatis dovezi clare ale infecției. Diferența dintre cele 2 metode disponibile în Alpha medical constă în sensibilitatea și specificitatea testului. Metoda ADN PCR are sensibilitate și specificitate mai mare. În această metodă, specificitatea ajunge la 98-100% și sensibilitatea este de 96-100% (la o concentrație de Ch. Trachomatis 5-10 IFU/ml). Determinarea antigenului este un test rapid imunocromatografic în care este necesar să se ia în considerare posibilitatea atât a falsului pozitiv cât și a negativității. Nu este posibil să se distingă speciile individuale de chlamydia (Ch. Trachomatis, Ch. Pneumoniae, Ch. Psittaci) prin testul rapid menționat mai sus, dacă acestea au fost prezente în proba eșantionată.

Tipuri de probe adecvate pentru examinările de mai sus:

  • tampon cervical, tampon vaginal, tampon uretral - pot fi examinate prin ambele metode,
  • urină, tampon de sac conjunctival - poate fi examinat numai prin PCR, determinarea Chl. trachomatis în urină a fost abolit în laboratoarele noastre, deci nu mai este inclus în noile tipuri de revendicări.

Condiții importante pentru eșantionarea corectă:

  • înainte de a șterge din colul uterin, ștergeți mucusul din colul uterin și aruncați acest tampon, efectuați colectarea cu un al doilea tampon,
  • pacientul nu trebuie să urineze cel puțin 1-2 ore înainte de tamponarea uretrei sau colectarea urinei,
  • cel mai bine este să luați primul flux de urină de dimineață, 1 probă destinată cultivării în același timp (este necesar un flux mediu de urină) și pentru dovada de Ch. trachomatis (este necesar primul flux de urină),
  • minimizați depozitarea urinei native la temperatura camerei (înainte de a fi transferat într-un tub de transport cu mediu cobas PCR).

Diagnosticare indirectă:

  • determinarea anticorpilor împotriva Ch. trachomatis IgM, IgA, IgG (examen de screening) prin metoda ELISA (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor),
  • determinarea anticorpilor împotriva Chlamydia spp. IgA, IgG (examen de confirmare) prin metoda Line Blot - într-un test anticorpi împotriva Ch. trachomatis, Ch. pneumoniae și este, de asemenea, posibil să se detecteze anticorpi împotriva Ch. psittaci (fiecare specie separat) (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

Diferite compoziții de antigeni conținute în diferite truse ELISA pot provoca rezultate diferite, în special la niveluri mai mici de anticorpi. Prin urmare, în laboratoarele noastre este posibil să se utilizeze o determinare confirmativă prin metoda Line Blot, care determină reactivitatea anticorpilor cu antigeni clamidiali individuali. Nu efectuăm automat determinarea confirmativă a anticorpilor prin metoda Line Blot, dar numai dacă este cerută în mod specific la cerere și în testul de screening aflăm pozitivitatea anticorpilor împotriva chlamidiei (Ch. Trachomatis sau Ch. Pneumoniae) în cel puțin o clasă (IgM, IgA sau IgG).

Antigenul clamidial dominant este un antigen MOMP specific pentru specie (proteină de membrană de suprafață). Speciile individuale de chlamydia au o compoziție diferită de aminoacizi de 25-35% a antigenelor MOMP, ceea ce creează condiții prealabile pentru diferențierea speciilor individuale de chlamydia. Cu toate acestea, este fiabil doar pentru infecția cu o specie clamidială. Atunci când este co-infectat cu mai multe specii, reactivitatea încrucișată a anticorpilor împotriva antigenului MOMP poate apărea și cu metoda Line Blot. Blotul conține, prin urmare, alți antigeni: OMP2 (proteină de membrană de suprafață specifică speciei), HSP60 (proteină Heat Shock) - este un marker al inflamației cronice și prezența anticorpilor de acest tip este asociată cu infertilitatea și artrita reactivă și antigenul MIP (Macrophage potențial de infectivitate) - factor de virulență superficial în microorganisme intracelulare. Anticorpii împotriva antigenilor individuali au o importanță diferită în evaluarea calității blot. Datorită prevalenței ridicate a Ch. pneumoniae în populație este de obicei interpretarea examenului serologic al anticorpilor din cap. trachomatis deseori provocatoare.

Tipuri de probe adecvate pentru examinările de mai sus:

  • sânge venos nativ,
  • ser.

Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum

Diagnosticare directă:

  • examinarea culturii a M. hominis și U. urealyticum pentru a determina susceptibilitatea la antibiotice - test de identificare a culturii bazat pe diferite proprietăți metabolice și rezistență naturală la micoplasme (la cerere Microbiologie clinică I),
  • dovezi ale ADN-ului M. hominis - prin PCR,
  • dovezi ale ADN-ului M. genitalium - prin PCR,
  • dovezi ale ADN-ului U. urealyticum- prin PCR.

Testele PCR sunt enumerate la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor.

Examenul culturii oferă posibilitatea unei evaluări semicantitative și, în cazul unei constatări pozitive, oferă și informații despre susceptibilitatea la antibiotice. Necesită colectarea într-un mediu de transport special din care nu este posibil să se efectueze alte examinări culturale. Rezultatele examinării culturii sunt disponibile în termen de 2-3 zile. ADN-ul micoplasmelor individuale prin PCR poate fi examinat din aceeași probă ca ADN-ul Ch. trachomatis. Dezavantajul determinării PCR în comparație cu examinarea culturii este colectarea unei serii de probe pentru 1 analiză PCR, astfel încât în ​​modul standard rezultatele sunt disponibile în termen de 5-7 zile.

Tipuri de probe adecvate pentru examinările de mai sus:

  • tampon de col uterin
  • tampon vaginal
  • tampon uretral, urină - poate fi examinat prin ambele metode.

Condiții importante pentru eșantionarea corectă:

  • condițiile sunt aceleași cu cele date pentru metodele directe de probă Ch. trachomatis.

Diagnosticare indirectă:

  • în diagnosticul de micoplasme urogenitale nu se efectuează.

Chlamydia pneumoniae

Diagnosticare directă:

  • Dovada ADN Ch. pneumoniae - Metoda PCR (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

Detectarea directă a ADN-ului Ch. pneumoniae ar trebui să fie standardul de aur în diagnosticul bolilor acute, având în vedere că există o „fereastră serologică” (răspuns întârziat la anticorpi) în primele săptămâni de infecție cu clamidie. ADN-ul Ch poate fi detectat prin PCR. pneumoniae din corpuri reticulare neinfecțioase precum și din corpuri elementare neînsuflețite. Prelevarea de probe din locul cel mai potrivit (în funcție de tipul de infecție) și calitatea probei prelevate au o influență decisivă asupra preciziei diagnosticului. Un rezultat pozitiv este o dovadă clară a infecției, un rezultat negativ înseamnă absența clamidiei în eșantionul prelevat, dar nu poate exclude infecția cu clamidie în tot corpul.

Tipuri de probe adecvate pentru examinarea de mai sus:

  • tampon nazofaringian, aspirat nazofaringian - pentru infecția căilor respiratorii superioare,
  • spută, spălături bronhoalveolare - în infecțiile tractului respirator inferior,
  • sângele colectat în EDTA poate ajuta la diagnosticul infecției chlamidice sistemice, când poate apărea persistența clamidiei în monocite și macrofage, nu este potrivit pentru infecții respiratorii acute,
  • lichid sinovial în detectarea clamidiei la pacienții cu artrită reactivă.

Condiții importante pentru eșantionarea corectă:

  • atunci când tamponați nazofaringele prin cavitatea bucală, este important să introduceți tamponul curbat în spatele marginii din spate a climatului moale, ștergeți mucoasa din bolta nazofaringelui cu o mișcare în formă de ventilator a tamponului și țineți tamponul în nazofaringe timp de 5 secunde pentru a absorbi secrețiile,
  • atunci când se tamponează din nazofaringe prin cavitatea nazală, trebuie introdus un tampon prin cavitatea nazală în nazofaringe cu o mișcare elicoidală ușoară (până când observați rezistență), rotind ușor și încet tamponul în nazofaringe timp de 5 secunde pentru a absorbi secreția,
  • pentru tamponarea din nas sau din amigdale există materiale pentru care este necesar să se bazeze pe un procent mai mare de falsă negativitate și, prin urmare, nu îl recomandăm în laboratorul nostru pentru diagnosticul de Ch. pneumoniae.

Diagnosticare indirectă:

  • determinarea anticorpilor împotriva Ch. pneumoniae IgM, IgA, IgG (examen de screening) prin metoda ELISA (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor),
  • determinarea anticorpilor împotriva Chlamydia spp. IgA, IgG (examen de confirmare) prin metoda Line Blot - într-un test anticorpi împotriva Ch. trachomatis și Ch. pneumoniae și este, de asemenea, posibil să se detecteze anticorpi împotriva Ch. psittaci (fiecare specie separat) (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

În cap. pneumoniae, o creștere a anticorpilor IgM nu are loc decât la 3-4 săptămâni după infecție; în timpul reinfectării, este posibil ca anticorpii să nu se formeze deloc. Anticorpii IgG sunt pozitivi la 6-8 săptămâni după infecție, creșterea mai rapidă a anticorpilor IgG este la reinfecții (1-3 săptămâni după reinfecție). După ce a depășit Ch. pneumoniae, pozitivitatea anticorpilor IgG persistă de obicei la 3-5 ani de la prima infecție, în reinfecții mai lungi de 5 ani. Timpul de înjumătățire al anticorpilor IgA este mai scurt decât cel al anticorpilor IgG și, prin urmare, pozitivitatea anticorpilor IgA este considerată a fi cel mai bun indicator al infecției persistente. Cu toate acestea, o prevalență ridicată nu numai a anticorpilor IgG, ci și a anticorpilor IgA se găsește adesea în populația adultă, care se poate datora nu numai persistenței infecției, ci și expunerilor repetate la Ch. pneumoniae. În schimb, la copiii cu vârsta mai mică de 5 ani, pozitivitatea anticorpilor la Ch. pneumoniae apare rar, ceea ce se poate datora stimulării antigenice slabe sau imaturității sistemului imunitar.

Mycoplasma pneumoniae

Diagnosticare directă:

  • Dovezi ADN ale M. pneumoniae - Metoda PCR (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

Cultivarea micoplasmelor nu este adecvată pentru diagnosticul standard, deoarece micoplasmele cresc foarte lent și coloniile nu sunt vizibile până la 2-5 săptămâni de cultivare. Prin urmare, detectarea directă a ADN-ului prin PCR este o alternativă adecvată, deoarece permite obținerea rapidă a rezultatelor (acestea sunt de obicei disponibile în laboratorul nostru în termen de 2-3 zile). Metoda PCR este extrem de sensibilă și specifică. Ca și în cazul clamidiei, tipul și calitatea probei au o mare influență asupra diagnosticului corect. Probabilitatea detectării micoplasmelor poate fi crescută prin trimiterea a 2 eșantioane din diferite locații. În stadiul infecției, când anticorpii IgG cresc, proba căilor respiratorii superioare poate fi deja negativă pentru ADN-ul M. pneumoniae, dar acest lucru nu exclude infecția în căile respiratorii inferioare.

Tipuri de probe adecvate pentru examinarea de mai sus:

  • tampon nazofaringian, tampon de gât, aspirat nazofaringian - pentru infecții ale tractului respirator superior,
  • spută, spălare bronhoalveolară, aspirat endotraheal - pentru infecția tractului respirator inferior.

Condiții importante pentru eșantionarea corectă:

  • tampoane nazofaringiene se pot face prin cavitatea bucală sau nazală; instrucțiunile pentru colectarea corectă sunt date mai sus pentru DNA Ch. pneumoniae,
  • tamponul nazofaringian trebuie completat cu tampon amigdalian,
  • în cazul unui tampon amigdalian, mucoasa amigdalelor trebuie ștearsă bine prin rotirea elicoidală a tamponului, deplasarea tamponului înainte și înapoi și apoi de sus în jos; la pacienții după amigdalectomie, trebuie prelevat un tampon din peretele posterior al faringelui,
  • la copii se recomandă tampoane nazofaringiene și tampoane de amigdale, la adulți spută.

Diagnosticare indirectă:

  • determinarea anticorpilor împotriva M. pneumoniae IgM, IgA, IgG (examen de screening) prin metoda ELISA (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor),
  • determinarea anticorpilor împotriva M. pneumoniae IgM, IgA, IgG (examen de confirmare) prin metoda Line Blot (la cerere Serologie infecțioasă, dovezi ale ADN-ului microorganismelor).

O creștere a anticorpilor IgM apare încă la o săptămână după infecție, dar de obicei numai în timpul infecției primare cu M. pneumoniae. Determinarea IgM este, prin urmare, cea mai grăitoare valoare la copiii preșcolari. Pozitivitatea IgM este raportată rar în timpul reinfectării. În cazul în care apare o creștere a anticorpilor IgM în timpul reinfecției, această pozitivitate poate persista mult timp și o astfel de constatare pe termen lung nu se corelează cu starea clinică a pacientului. Anticorpii IgG apar la 2 - 3 săptămâni după creșterea IgM în timpul infecției primare, creșterea este mai rapidă la reinfecție. Prevalența anticorpilor IgG împotriva Mycoplasma pneumoniae este semnificativ mai mare la copiii mici (sub 5 ani) decât prevalența anticorpilor IgG împotriva Chlamydia pneumoniae. Anticorpii IgA sunt cel mai bun indicator al infecției active - datorită creșterii lor rapide și a celui mai scurt timp de înjumătățire în comparație cu IgG și IgM. După depășirea infecției, pozitivitatea anticorpilor IgA rămâne cea mai scurtă, pozitivitatea anticorpilor IgG poate persista timp de luni până la ani.

Concluzie

În concluzie, trebuie spus că diagnosticul corect și tratamentul precoce al infecțiilor cu chlamydial și micoplasmal este un proces relativ solicitant, care începe cu o colecție temeinică de material adecvat, continuă cu alegerea corectă a metodei de examinare și interpretarea corectă a rezultatelor. Infecțiile cauzate de microorganismele descrise sunt clasificate ca așa-numitele atipice, care pot duce la afectarea imunității și pot afecta aproape orice organ. Tratamentul de succes necesită o bună cooperare nu numai între pacient și medic, ci și de către diagnosticul din laborator.