Jurnalul Oficial L 179, 09/07/2002 p. 0013 - 0018
Regulamentul (CE) nr 1226/2002
de modificare a anexei B la Directiva 64/432/CEE a Consiliului
COMISIA COMUNITĂȚILOR EUROPENE,
Având în vedere Tratatul de instituire a Comunității Europene,
Având în vedere Directiva Consiliului 64/432/CEE [1] din 26 iunie 1964 privind problemele de sănătate animală care afectează comerțul intracomunitar cu bovine și porcine, astfel cum a fost modificată ultima dată prin Regulamentul (CE) nr. 1774/2002 al Comisiei. 535/2002 [2], în special articolul 16 alineatul (2) al doilea paragraf, 1,
(1) La 11 octombrie 1999, Comitetul științific pentru sănătatea animală și bunăstarea animalelor a aprobat un raport [3] privind modificarea anexelor tehnice la Directiva 64/432/CEE a Consiliului pentru a ține seama de progresele științifice referitoare la tuberculoză, bruceloză și bovine enzootice. leucoză.
(2) În conformitate cu raportul de mai sus, testele de tuberculoză ar trebui efectuate în conformitate cu Manualul de standarde pentru teste de diagnostic și vaccinuri, ediția a treia, 1996 a Office International des Epizooties (OIE).
(3) În august 2001, OIE a publicat a patra ediție a manualului din 2000, incluzând anumite modificări referitoare la descrierea testelor de tuberculoză.
(4) În ianuarie 2002, Direcția Europeană pentru Calitatea Medicamentelor a publicat a patra ediție a Inventarului european al medicamentelor din 2002, inclusiv monografiile 0535 și 0536 privind derivații proteici purificați ai tuberculinei aviare și bovine.
(5) Prin urmare, este necesar să se modifice anexa B la Directiva 64/432/CEE pentru a stabili procedurile de testare aplicabile supravegherii și comerțului intracomunitar, ținând seama de avizul Comitetului științific veterinar.
(6) Măsurile prevăzute în prezentul regulament sunt conforme cu avizul Comitetului permanent pentru lanțul alimentar și sănătatea animală,
A ADOPTAT PREZENTUL REGULAMENT:
Anexa B la Directiva 64/432/CEE se înlocuiește cu anexa la prezentul regulament.
Prezentul regulament intră în vigoare în a douăzecea zi de la data publicării în Jurnalul Oficial al Comunităților Europene.
Prezentul regulament este obligatoriu în toate elementele sale și se aplică direct în toate statele membre.
Adoptat la Bruxelles, 8 iulie 2002
[1] Ú. în. 121U 121, 29.7.1964, p. 1977/64.
[2] Ú. în. LU L 80, 23.3.2002, p. 22.
1. IDENTIFICAREA AUTORULUI
Prezența Mycobacterium bovis (M. bovis) a agentului de tuberculoză bovină în probele clinice și post-mortem poate fi demonstrată prin examinarea modificărilor de culoare sau a tehnicilor de imunoperoxidază și confirmată prin cultivarea organismului pe mediu de izolare primar.
Materialul patologic pentru confirmarea M. bovis trebuie prelevat din ganglionii limfatici excesivi (anormali) și din organele parenchimatoase, cum ar fi plămânii, ficatul, splina etc. În cazurile în care animalele nu prezintă leziuni patologice, trebuie recoltate probe din ficat retropharingian, bronșic, mediastinal, supramamar, mandibular și anumitor ganglioni limfatici mezenterici și ficat pentru examinare și cultură.
Identificarea izolatelor poate fi de obicei realizată prin determinarea proprietăților culturale și biochimice. Reacția în lanț a polimerazei (PCR) poate fi, de asemenea, utilizată pentru a detecta complexul M. tuberculosis. Tehnicile de analiză ADN se pot dovedi mai rapide și mai fiabile decât metodele biochimice pentru a distinge M. bovis de ceilalți membri ai complexului M. tuberculosis. Amprentele genetice fac posibilă distincția între diferite tulpini de M. bovis și descrierea exemplelor tipice de origine, transmitere și răspândire a M. bovis.
Tehnicile și mijloacele utilizate, standardizarea lor și interpretarea rezultatelor trebuie să fie în conformitate cu ceea ce este specificat în Manualul OIE de standarde pentru teste de diagnostic și vaccinuri, ediția a patra, 2000, capitolul 2.3.3 (tuberculoză bovină).
2. TESTUL PIELEI TUBERCULINEI
Pentru efectuarea testului cutanat oficial pe tuberculină în conformitate cu procedurile menționate la punctul 2.2, se utilizează tuberculina PPD (derivați de proteine purificate) care respectă standardele menționate la punctul 2.1.
2.1 2.1. Standarde pentru tuberculină (bovină și aviară)
Un derivat proteic purificat de tuberculină (PPD, bovin sau aviar) este un preparat obținut din produse tratate termic de creștere și degradare a Mycobacterium bovis sau Mycobacterium avium (oricare este posibil) capabil să detecteze hipersensibilitatea întârziată la un animal susceptibil la microorganisme. din aceeași specie.
2.1.2 2.1.2. Producție
Se obține din fracțiuni solubile în apă preparate prin încălzire în vapori de apă care curg liber și apoi filtrarea culturilor de M. bovis sau M. avium (după caz) crescute într-un mediu lichid sintetic. Fracția activă a filtratului, constând în principal din proteine, este izolată prin precipitare, spălare și redizolvare. Se poate adăuga un conservant antimicrobian care nu va provoca reacții fals pozitive, cum ar fi de ex. fenol. Preparatul steril final, care nu conține micobacterii, este transferat aseptic în recipiente de siguranță din sticlă sterilă, care sunt apoi sigilate pentru a preveni contaminarea. Preparatul poate fi liofilizat.
2.1.3 Identificarea produsului
Se injectează o gamă de doze gradate în piele la diferite locuri în cobai albini sensibilizați corespunzător, dintre care niciunul nu trebuie să cântărească mai puțin de 250 g. După 24 până la 28 de ore, apar reacții sub formă de edem edem cu eritem cu sau fără necroză la punctele de injecție. Amploarea și intensitatea reacțiilor variază în funcție de doză. Cobaiii nesensibilizați nu prezintă niciun răspuns la injecții similare.
2.1.4.1 pH: pH-ul variază între 6,5 și 7,5.
2.1.4.2 Fenol: Dacă preparatul care urmează să fie examinat conține fenol, concentrația sa nu trebuie să depășească 5 g/l.
2.1.4.3 Efect sensibilizant: Utilizați un grup de trei cobai care nu au fost tratați cu niciun material care interferează cu testul. De 3 ori, la intervale de cinci zile, injectați subcutanat în fiecare cobai o doză de produs care urmează să fie examinată, echivalentă cu 500 UI în 0,1 ml. La 15 până la 21 de zile după a treia injecție, injectați aceeași doză (500 UI) în pielea acestor animale și într-un grup martor de trei cobai de aceeași greutate care nu primiseră anterior injecții cu tuberculină. La 24 până la 28 de ore după ultimele injecții, reacțiile celor două grupuri nu sunt semnificativ diferite.
2.1.4.4 Toxicitate: Se utilizează doi cobai, fiecare cântărind cel puțin 250 g, care nu au fost tratați anterior cu niciun material care interferează cu testul. Se injectează 0,5 ml de produs care urmează să fie examinat subcutanat în fiecare cobai. Observați animalele timp de șapte zile. Nu apar efecte anormale în timpul perioadei de observare.
2.1.4.5 Sterilitate: în conformitate cu testul de sterilitate prescris în monografia privind vaccinurile de uz veterinar, ediția a IV-a, 2002 Farmacopeea europeană.
Eficacitatea unui derivat purificat de proteină tuberculină (bovină și aviară) este determinată prin compararea reacțiilor obținute la cobai sensibilizați prin injectarea intradermică a unei serii de diluție a produsului care urmează să fie examinată cu reacțiile obținute cu concentrații cunoscute ale derivatului proteic tuberculinic purificat. (bovine sau aviare). considerații), calibrate în unități internaționale.
Testul nu este valid până când limitele de eroare așteptate (P = 0,95) sunt mai mici de 50% și mai mari de 200% din eficiența estimată. Potența estimată pentru tuberculina bovină nu este mai mică de 66% și nu mai mult de 150% din potența declarată. Potența estimată pentru tuberculina aviară nu este mai mică de 75% și nu mai mult de 133% din potența declarată. Potență declarată cu cel puțin 20.000 UI/ml pentru oricare dintre aceste tuberculine (bovine și aviare).
A se păstra la 5 ± 3 ° C și a se proteja de lumină.
Eticheta indică:
- eficacitate în unități internaționale pe mililitru,
- numele și cantitatea fiecărei substanțe adăugate,
- în cazul preparatelor liofilizate:
- numele și volumul lichidului de reconstrucție care trebuie luat,
- utilizarea produsului după reconstrucție.
2.2 2.2. Proceduri de testare
2.2.1 Următoarele sunt recunoscute ca teste oficiale ale tuberculinei intradermice:
- test intradermic simplu: acest test necesită o singură injecție de tuberculină bovină,
- test intradermic comparativ: acest test necesită o injecție de tuberculină bovină și o injecție de tuberculină aviară administrată simultan.
2.2.2 Doza de tuberculină injectată este:
- cel puțin 2000 UI tuberculină bovină,
- cel puțin 2000 UI de tuberculină aviară.
2.2.3 Volumul oricărei injecții injectate nu trebuie să depășească 0,2 ml.
2.2.4 Testele de tuberculină se efectuează prin injectarea tuberculinei în pielea gâtului. Punctele de injecție trebuie amplasate la interfața dintre treimea din față și mijlocul gâtului. Când este injectat în același animal, atât tuberculina aviară, cât și cea bovină, locul de injectare a tuberculinei aviare este la aproximativ 10 cm de gât, iar locul de injectare a tuberculinei bovine este cu aproximativ 12,5 cm mai jos pe o linie paralelă cu linia umărului sau pe alta laturile gâtului; în cazul animalelor tinere în care nu există spațiu pentru separarea suficientă a locurilor pe o parte a gâtului, se administrează o injecție pe fiecare parte a gâtului în aceleași locuri în mijlocul treimii mijlocii a gâtului.
2.2.5 Tehnica tuberculinei și interpretarea reacțiilor sunt după cum urmează:
Locurile de injectare sunt tăiate și curățate. Pliul pielii de pe fiecare zonă tăiată este apucat între degetul arătător și degetul mare, măsurat cu etriere și înregistrat. Doza de tuberculină este apoi injectată în așa fel încât să se asigure distribuția intradermică a tuberculinei. Se poate utiliza un ac steril scurt cu o margine teșită orientată spre exterior, cu o seringă divizată umplută cu tuberculină străpunsă oblic în straturile mai adânci ale pielii. Injecția adecvată poate fi confirmată prin simțirea unei mici umflături asemănătoare unui bob de mazăre pe fiecare parte a injecției. Grosimea pliului cutanat la fiecare loc de injectare trebuie re-măsurată la 72 de ore (± 4 ore) după injectare și înregistrată.
2.2.5.2 Interpretarea reacțiilor
Interpretarea reacțiilor se bazează pe observații clinice și pe creșterea (creșterile) observată (i) în grosimea pliului cutanat la locurile de injectare la 72 de ore după injectarea tuberculinei.
(a) Reacție adversă: dacă se observă numai umflături limitate cu o creștere a grosimii pliului cutanat de cel mult 2 mm fără semne clinice precum edem difuz sau extins, revărsat, necroză, durere sau inflamație a canalelor limfatice din zonă sau noduli limfatici.
(b) Reacție neconvingătoare: dacă nu se observă niciunul dintre semnele clinice menționate la litera (a) sau dacă creșterea grosimii pliului cutanat este mai mare de 2 mm și mai mică de 4 mm.
(c) Reacție pozitivă: dacă se observă semnele clinice menționate la litera (a) sau dacă se observă o creștere a grosimii pliului cutanat de 4 mm sau mai mult la locul injectării.
2.2.5.3 Interpretarea testelor oficiale intradermice de tuberculină este după cum urmează:
2.2.5.3.1 Test intradermic simplu:
(a) pozitiv: o reacție bovină pozitivă definită la punctul 2.2.5.2. c);
(b) neconcludentă: reacție neconcludentă definită la punctul 2.2.5.2. b);
(c) negativ: o reacție bovină negativă definită la punctul 2.2.5.2. A).
Animalele care nu răspund la un test intradermic simplu vor fi supuse unui test suplimentar după cel puțin 42 de zile.
Animalele care nu reacționează negativ la acest al doilea test se consideră că au reacționat pozitiv la test.
Animalele care răspund pozitiv la un test intradermic simplu pot fi supuse unui test intradermic comparativ dacă se suspectează o reacție fals pozitivă sau de interferență.
2.2.5.3.2 Test comparativ intradermic pentru confirmarea și menținerea statutului oficial de turmă indemn de tuberculoză:
(a) pozitiv: o reacție bovină pozitivă cu peste 4 mm mai mare decât reacția aviară sau prezența semnelor clinice;
(b) neconvingătoare: o reacție bovină pozitivă sau neconvingătoare care este cu 1 până la 4 mm mai mare decât reacția aviară și absența semnelor clinice;
(c) negativ: o reacție bovină negativă sau o reacție bovină pozitivă sau neconcludentă care este, totuși, egală sau mai mică decât o reacție aviară pozitivă sau neconcludentă și absența semnelor clinice în ambele cazuri.
Animalele care nu au răspuns în mod comparativ la un test intradermic comparativ vor fi supuse unui test suplimentar după cel puțin 42 de zile. Animalele care nu reacționează negativ la acest al doilea test se consideră că au reacționat pozitiv la test.
2.2.5.3.3 Statutul oficial indemn de tuberculoză al efectivului poate fi suspendat, iar animalele din turmă nu trebuie să poată intra în comerț intracomunitar până când statutul următoarelor animale nu a fost restabilit:
(a) animale care au fost considerate că nu răspund la un simplu test intradermic pentru tuberculină;
(b) animale care au fost considerate pozitive pentru un simplu test intradermic de tuberculină, dar care așteaptă să fie reevaluate sub forma unui test intradermic comparativ;
(c) animale care au fost considerate că nu răspund la un test intradermic comparativ.
2.2.5.3.4 În cazul în care legislația comunitară prevede ca animalele să fie supuse unui test intradermic înainte de mișcare, testul trebuie interpretat în sensul că niciun animal care nu prezintă o creștere a pliului cutanat mai mare de 2 mm sau prezența semnelor clinice nu trebuie plasată pe piață în cadrul comunității.
2.2.5.3.5 2.2.5.3.5. Pentru a permite demonstrarea numărului maxim de animale infectate și bolnave într-o turmă sau regiune, statele membre pot modifica criteriile de interpretare a testului pentru a obține o sensibilitate îmbunătățită la test, cu toate reacțiile neconvingătoare menționate la 2.2.5.3. 1 (a). b) și 2.2.5.3.2. scrisoare (b) sunt considerate a fi reacții pozitive.
3. TESTARE SUPLIMENTARĂ
Pentru a permite demonstrarea numărului maxim de animale infectate și bolnave într-o turmă sau regiune, statele membre pot permite utilizarea testului gamma-interferon prezentat în Manualul OIE de standarde pentru teste de diagnostic și vaccinuri, ediția a IV-a, 2000, Capitolul 2.3.3. (tuberculoza bovină), în plus față de testul tuberculinei.
4. INSTITUȚII DE STAT ȘI LABORATORII NAȚIONALE DE REFERINȚĂ
4.1 Roluri și responsabilități
Institutele de stat și laboratoarele de referință incluse la punctul 3.2. sunt responsabili pentru testarea oficială a tuberculinelor sau reactivilor reglementați de alineatele 2 și 3 în propriile lor state pentru a se asigura că fiecare dintre acești tuberculini sau reactivi este adecvat în raport cu standardele de mai sus.
4.2 Lista institutelor de stat și a laboratoarelor naționale de referință
Institutul Paul-Ehrlich (PEI), Bundesamt für Sera und Impstoffe, D-23207 Langen; Bundesinstitut für gesundheitlichen Verbraucherschutz und Veterinärmedizin - Area Jena - D-07743 Jena;
Institut Scientifique de la Santé Publique - Louis Pasteur, 14 Rue Juliette Wytsman - B 1050 Bruxelles - Belgia;
Laboratorul Național al Medicamentelor Veterinare, Fougères;
4. Marele Ducat al Luxemburgului:
Institutul țării furnizoare;
Institutul Superior de Sanitație, Roma;
Institutul Central pentru Controlul Zootehniei Lelystad (CIDC-Lelystad), Lelystad;
Danmarks Veterinærinstitut, Bülowsvej 27, DK-1790 Copenhaga;
Institutul țării furnizoare;
9. Regatul Unit:
Agenția de laborator veterinar, Addlestone, Weybridge;
Kentro Kentinatri Kindramatonos, Napoli 25, 153 10 Ainea;
Laboratorul de salubrizare și producție animală din Granada;
Laboratorio Nacional de Investigação Veterinária, Lisabona;
Bundesanstalt für veterinärmedizinische Untersuchungen, Mödling;
Sănătatea animalelor și îngrijirea sănătății animalelor - laitos - Institutele de cercetare pentru medicina veterinară și alimentară, Helsinki;
Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala.